细鳞鱼受精卵不同胚胎发育阶段对震动的敏感性试验
葛京张耀红++高倩++徐建华++妥志利++赵士超
细鳞鱼，身材纤细，头圆、嘴宽、身披豹纹，几乎看不见有鳞片，是有名的冷水经济鱼类，但在人工繁育期间孵化率却不高，有的地方甚至达不到50%。胚胎的发育过程历来是极为细致复杂的，特别是敏感期阶段，稍有动作便会导致受精卵的大量死亡。而在非敏感时期，适时做些改变，如消毒、挑拣死卵等，不仅不影响受精卵正常发育，还能优化孵化环境，提高孵化率。
为了提高其孵化率，我们在涞源县昌源渔场，设计了细鳞鱼受精卵不同发育阶段随水流搅动、上下翻滚等震动刺激的敏感性试验，以期发现细鳞鱼受精卵在不同胚胎发育阶段的敏感性差异，对规模生产产生积极的指导意义。
1 材料与方法
1.1 材料
孵化用水为地下冷泉水，水温9～9.5 ℃，DO 6.5～7.5 mg/L。试验鱼卵为渔场内自培的5龄亲鱼进行人工繁殖获得。亲鱼在2015年3月底陆续开始激素注射诱导，把4月12日采卵挤精后干法受精获得的受精卵4.5万粒，作为试验用卵。
1.2 方法
备用受精卵置于设有流水的大玻璃缸中，并用带网眼塑料筐和铁架固定。每2 h进行显微镜观察，待50%以上的受精卵进入某一发育阶段时，随机捞取受精卵若干，挑选外观发育正常鱼卵500粒以上，在塑料盆中搅拌刺激后放入带网眼的塑料筐中，塑料筐置于有微流水的水渠内的铁架子上，水渠水面宽50 cm，水深60 cm，保持卵粒距离水面10 cm。搅拌时用手沿盆边顺时针匀速、轻柔地搅拌20次，逆时针同样动作搅拌20次，幅度以鱼卵稍微离开盆底做旋涡状运动。随后用手轻微上下撩动盆边的水，使鱼卵小幅度上下翻转，同样20次。
试验从4月12日晚8点开始，采样前先对受精卵进行显微镜观察，然后挑选、搅拌，刺激后把受精卵放入水渠中的塑料筐，24 h后计算死亡量，一直持续到发眼卵出现为止，根据弃卵率[1]（死卵量与总卵数的百分比）得出不同发育阶段对外界环境刺激的敏感性差异。
2 结果
资料表明，虹鳟、大银鱼[2]、七彩鲑[3]等冷水鱼，在不同胚胎发育阶段对外界刺激的敏感性不同。从试验来看，细鳞鱼受精卵对外界环境刺激比较敏感，且在不同发育阶段表现出明显的差异，弃卵率波动较大，试验结果见表1。
3 讨论
试验表明，细鳞鱼的胚胎发育对外界刺激存在明显的敏感期。在不同发育阶段，弃卵率的高低表现为不同程度的敏感性。细鳞鱼卵受精后吸水静置时，处于膨胀阶段，对于外界刺激较敏感，弃卵率较高；卵裂期、囊胚期敏感性一般，弃卵率较低，状态较稳定，可以进行消毒、挑卵或者短途运输等；到囊胚后期、原肠阶段，弃卵率升高，对外界水流刺激较敏感，直至胚孔封闭、脑部分化阶段，弃卵率急速升高，大大超过50%，此阶段建议不对鱼卵采取任何打扰；随后，尾牙、胸鳍、眼晶体、尾鳍开始分化，弃卵率大大走低，此阶段如果有必要，如长水霉后可以进行消毒、挑卵等，从而降低经济损失；到了发眼期，对外界刺激基本无反应，状态稳定，受精卵算是到了“安全期”，挑卵、消毒、运输等没有问题。
试验期间，由于塑料盆多，每个装的鱼卵极少，且有微流水不断冲洗，没有滋生水霉，没有使用任何药物，避免了试验误差。但由于亲鱼培育不到位，一开始的受精卵质量差些，表现为与往年相比，个体小，色泽暗淡，吸水静置后死卵较多，大玻璃缸中的备用试验用卵目测成活率不到50%，等等。这些可能对试验数据有些影响，如弃卵率普遍要高些，如发眼后水流震荡刺激还有2.39%的弃卵率等。
另外，受精卵震动刺激后静置24 h计数时，发现刚计完数，数出的好卵有部分在一分钟内变白，变白数量与弃卵率有关，弃卵率越高时，好卵变白死亡的数量越多，猜测与卵本身的敏感期相关，也可能与受精卵的质量有关，有待于进一步研究。
参考文献：
[1]
施德亮.秦岭细鳞鲑早期发育观察[J].中国水产科学，2012（7）：557-567
[2] 张耀红.振动对大银鱼胚胎发育的影响──大银鱼孵化中敏感期试验观察[J].渔业现代化，1997（3）：9-11
[3] 张耀红.七彩鲑受精卵不同发育阶段对外界刺激的敏感性试验[J].河北渔业，2015（1）：29，53
（收稿日期：2015-09-22）
