不同品种鸡源J亚群禽白血病毒株致肿瘤差异性研究

    罗青平　张蓉蓉　温国元　张腾飞　王红琳　艾地云　汪宏才　罗玲　李兰珍　邵华斌

    摘要：选取不同品种鸡群的J亚群白血病病毒代表毒株分别感染SPF鸡和地方鸡，记录分析感染鸡的临床症状、产生肿瘤时间。结果表明，商品蛋鸡源毒株对SPF鸡和地方鸡致肿瘤时间均早于地方鸡源毒株，感染SPF鸡后出现肿瘤症状比例和死亡率分别为42.7%和11.3%，远高于地方鸡源毒株的19.3%和4.7%。感染地方鸡鸡后出现肿瘤症状比例和死亡率分别为26%和8%，远高于地方鸡源毒株的9%和3.3%。可见这两类不同来源毒株致肿瘤特性差异显著，商品蛋鸡源毒株致肿瘤性明显强于地方鸡源毒株。

    关键词：J 亚群禽白血病病毒；不同品种鸡；致肿瘤；差异

    中图分类号：S831 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2014）10-0014-03

    禽白血病病毒（Avian leukosis virus， ALV）属于反转录病毒科中的禽反转录病毒属，是最早证明能引发鸡肿瘤的病毒。J亚群禽白血病病毒（ALV-J）是20世纪80年代末Payne等[1]首先从肉用型鸡中分离鉴定出来的禽白血病病毒新亚群[2]。也是目前中国鸡群中流行最为广泛的外源性病毒亚群。中国于2002年徐镔蕊等[3]首次报道了蛋鸡自然感染ALV-J引起髓样细胞瘤的病例，之后在我国的地方鸡三黄鸡[4]和中国的纯地方品系[5～8]中也陆续出现了ALV-J及由此引发的骨髓样细胞瘤病例。ALV-J在我国流行的范围越来越广，由于其发病高峰集中在性成熟之后，发病死亡率达30%，可导致鸡群产蛋率从高峰下降到40%左右或者根本就没有高峰期，对我国养鸡业造成了巨大的经济损失。2008年以来，J亚群禽白血病在湖北省商品蛋鸡和地方鸡群中广泛流行爆发[9]，从流行病学调查来看，商品蛋鸡发病率明显高于地方鸡，这究竟是因为两种鸡群感染的病毒的致病性有差异还是两种鸡群自身对病毒的敏感性有差异呢？本研究主要选取地方鸡种的分离株HB101、HB113、HB127和商品蛋鸡的分离株HB097、HB105、HB121进行感染试验，观察分析其致肿瘤性的差异，为该病的防控和净化提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 禽白血病毒株及其原病料组织

    本研究室-80℃保存的商品蛋鸡分离株HB097、HB105、HB121及其原病料组织，地方鸡源毒株HB101、HB113、HB127及其原病料组织。

    1.2 试验鸡

    SPF鸡：购买北京梅里亚SPF鸡胚，自行孵化出鸡苗

    湖北地方鸡：武新大别山鸡鸡苗，购自武汉市新洲宝强养鸡合作社。

    1.3 接种物的处理

    取各分离株的细胞培养液0.1 mL与其对应的病料组织匀浆冻融处理后的上清溶液0.2 mL混合，制备成各分离株混合液各0.3 mL。

    1.4 试验设计

    SPF鸡苗1日龄检测均为禽白血病抗原抗体阴性。3日龄时，选择外观健康的SPF鸡310只，分为7组，第1～6组每组50只。第1～3组腹腔注射分别取制备好的J亚群禽白血病HB097、HB105、HB121分离株混合液各0.3 mL/只；第4～6组腹腔注射分别取制备好的J亚群禽白血病HB101、HB113、HB127分离株混合液各0.3 mL/只；第7组为对照组10只，腹腔注射灭菌生理盐水，0.3 mL/只。各组龄死亡鸡肝脾肿大，眼观可见白色结节，80日龄可见个别及体表血管瘤；而第4～6组地方鸡源毒株HB101、HB113、HB127感染鸡45日龄才出现死亡，100日龄肝脾出现眼观可见的肿瘤结节，部分鸡出现体表血管瘤；第7组鸡未见发病临床症状、肿瘤和死亡。

    由表1可见，商品蛋鸡源毒株HB097、HB105、HB121感染SPF鸡出现肿瘤率平均为42.7%，死亡率为11.3%，而地方鸡源毒株HB101、HB113、HB127感染SPF鸡出现肿瘤率平均为19.3%，死亡率为4.7%，商品蛋鸡源毒株对SPF鸡的致瘤能力明显高于地方鸡源毒株。

    2.2 两类来源毒株感染武新大别山鸡试验结果

    两类不同来源分离株感染3日龄湖北地方鸡种发现，第1～3组商品蛋鸡源毒株HB097、HB105、HB121感染鸡第1～6周未出现死亡，有部分鸡只消瘦，剖检肝脾肿大，感染鸡45日龄出现肿瘤和死亡，而第4～6组地方鸡源毒株HB101、HB113、HB127感染鸡100日龄才出现肿瘤和死亡；第7组鸡未见发病临床症状、肿瘤和死亡。统计结果见表2。

    由表2可见商品蛋鸡源毒株HB097、HB105、HB121感染地方鸡出现肿瘤率平均为28%，死亡率为8%，而地方鸡源毒株HB101、HB113、HB127感染SPF鸡出现肿瘤率平均为9%，死亡率为3.3%，商品蛋鸡源毒株对地方鸡的致瘤能力明显高于地方鸡源毒株。

    3 讨论

    禽白血病是一种外来病，大多由于引种而传入我国。本研究以SPF鸡作为试验模型，主要是因为SPF鸡的品种是来航鸡，为外来品种，而湖北省养殖的商品蛋鸡几乎全为外来品种；武新大别山鸡是湖北本地特色鸡种，从未引入外血，从理论上讲不可能感染禽白血病。当前地方鸡中广泛流行的J亚群禽白血病究竟是因为病毒的变异还是疫苗等途径的感染？这个问题值得深入研究。从试验结果来看，不同商品蛋鸡源毒株感染SPF鸡和地方鸡后，其致瘤时间和致瘤率有差异，但总体看来这类毒株对SPF鸡的致瘤时间明显早于地方鸡源毒株，由此可见SPF鸡和地方鸡两种鸡对商品蛋鸡源毒株的感染性是有差异的，这种差异与地方鸡源毒株的差异一致。由此可以推断J亚群禽白血病病毒对SPF鸡的致病性高于地方鸡。

    本研究采用毒株的细胞分离液和对应的病料组织研磨液进行混合后作为感染材料，主要是在前期的预实验中发现单纯的J亚群禽白血病病毒细胞毒感染鸡群后，未见肿瘤产生，但在一定的时间段内可出现短暂的病毒血症，个别鸡只有抗体产生；单纯的病料组织研磨液作为感染材料也能复制出典型的J亚群禽白血病病例，但可能由于组织中病毒含量较低，复制成功效率较低，也不适合作为较为规范的病毒感染材料。

    4 结论

    通过对两类不同来源的分离株分别感染SPF鸡和地方鸡后，观察可见：商品蛋鸡源禽白血病毒株对SPF鸡和地方鸡的致瘤时间均早于地方鸡源毒株，致瘤率及死亡率均高于地方鸡源毒株。可见这两类不同来源毒株致肿瘤特性差异显著，商品蛋鸡源毒株致肿瘤性明显强于地方鸡源毒株。

    参考文献：

    [1] PAYNE L N，BROWN S R，BUMSTEAD K，et al. A novel subgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens[J]. J Gen Virol，1991，72：801-807.

    [2] CUI Z，DU Y，ZHANG Z，et al. Comparison of Chinese field strains of avian leukosis subgroup J viruses with prototype strain HPRS-103and United States strains[J].Avian Dis，2003，47： 1321-1330

    [3] XU B，DONG W，YU C，et al. Occurr ence of avian leukosis virus subgroup J in commercial layer flocks in China[J]. Avian Pathol，2004，33：13-17.

    [4] 成子强，张 利，刘思当，等.中国麻鸡中发现禽J亚群白血病[J].微生物学报，2005，45（4）： 584-587.

    [5] 朱美真，吴玉宝，崔治中.地方品系鸡中一株ALV-A的分离鉴定[J].中国动物传染病学报，2009，17（4）：31-35.

    [6] 张洪海，刘 青，邱 波，等.地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染[J].畜牧兽医学报，2009，40（8）：1215-1221.

    [7] 赵冬敏，张青婵，崔治中. 芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定[J].病毒学报，2010，26（1）：53-57.

    [8] 高玉龙，邵华斌，罗青平，等. 2009年我国部分地区禽白血病分子流行病学调查[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：32-36.

    [9] 罗青平，张蓉蓉，温国元，等. 2009年湖北省禽白血病的流行特点中国家禽[J].2010，32（7）：44-45.

    4 结论

    通过对两类不同来源的分离株分别感染SPF鸡和地方鸡后，观察可见：商品蛋鸡源禽白血病毒株对SPF鸡和地方鸡的致瘤时间均早于地方鸡源毒株，致瘤率及死亡率均高于地方鸡源毒株。可见这两类不同来源毒株致肿瘤特性差异显著，商品蛋鸡源毒株致肿瘤性明显强于地方鸡源毒株。

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    [7] 赵冬敏，张青婵，崔治中. 芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定[J].病毒学报，2010，26（1）：53-57.

    [8] 高玉龙，邵华斌，罗青平，等. 2009年我国部分地区禽白血病分子流行病学调查[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：32-36.

    [9] 罗青平，张蓉蓉，温国元，等. 2009年湖北省禽白血病的流行特点中国家禽[J].2010，32（7）：44-45.

    4 结论

    通过对两类不同来源的分离株分别感染SPF鸡和地方鸡后，观察可见：商品蛋鸡源禽白血病毒株对SPF鸡和地方鸡的致瘤时间均早于地方鸡源毒株，致瘤率及死亡率均高于地方鸡源毒株。可见这两类不同来源毒株致肿瘤特性差异显著，商品蛋鸡源毒株致肿瘤性明显强于地方鸡源毒株。

    参考文献：

    [1] PAYNE L N，BROWN S R，BUMSTEAD K，et al. A novel subgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens[J]. J Gen Virol，1991，72：801-807.

    [2] CUI Z，DU Y，ZHANG Z，et al. Comparison of Chinese field strains of avian leukosis subgroup J viruses with prototype strain HPRS-103and United States strains[J].Avian Dis，2003，47： 1321-1330

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    [6] 张洪海，刘 青，邱 波，等.地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染[J].畜牧兽医学报，2009，40（8）：1215-1221.

    [7] 赵冬敏，张青婵，崔治中. 芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定[J].病毒学报，2010，26（1）：53-57.

    [8] 高玉龙，邵华斌，罗青平，等. 2009年我国部分地区禽白血病分子流行病学调查[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：32-36.

    [9] 罗青平，张蓉蓉，温国元，等. 2009年湖北省禽白血病的流行特点中国家禽[J].2010，32（7）：44-45.