化学发光酶免疫分析测定鱼肉中呋喃它酮代谢物方法研究
戴尽波 徐振林 刘凤银 杨金易 孙远明 王弘 雷红涛 沈玉栋
摘 要 建立了呋喃它酮代谢物5吗啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮(AMOZ)间接竞争化学发光酶免疫分析(icCLEIA)检测方法,通过单因素实验优化了包被原浓度、抗体稀释倍数、反应缓冲体系及浓度、竞争反应时间等参数,结果表明icCLEIA最佳反应条件为:包被抗原浓度为10 ng/mL,抗体稀释60000倍,最佳竞争时间为50 min,体系缓冲液0.01 mol/L PBS(pH 7.4)。在优化的条件下,本方法的线性检测范围为0.026~3.52 μg/L, IC50为0.29 μg/L,检出限(LOD,IC10)为0.012 μg/L。对鱼肉样品的平均添加回收率在101.4%~115.5 %之间。建立的icCLEIA方法可用于实际样品中AMOZ残留检测。
关键词 呋喃它酮; 5吗啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮; 间接竞争化学发光酶免疫分析; 多克隆抗体; 鱼肉
摘 要 建立了呋喃它酮代谢物5吗啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮(AMOZ)间接竞争化学发光酶免疫分析(icCLEIA)检测方法,通过单因素实验优化了包被原浓度、抗体稀释倍数、反应缓冲体系及浓度、竞争反应时间等参数,结果表明icCLEIA最佳反应条件为:包被抗原浓度为10 ng/mL,抗体稀释60000倍,最佳竞争时间为50 min,体系缓冲液0.01 mol/L PBS(pH 7.4)。在优化的条件下,本方法的线性检测范围为0.026~3.52 μg/L, IC50为0.29 μg/L,检出限(LOD,IC10)为0.012 μg/L。对鱼肉样品的平均添加回收率在101.4%~115.5 %之间。建立的icCLEIA方法可用于实际样品中AMOZ残留检测。
关键词 呋喃它酮; 5吗啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮; 间接竞争化学发光酶免疫分析; 多克隆抗体; 鱼肉