硬头鳟卵黄囊仔鱼发育的观察研究
王振富等
硬头鳟（steelhead，salmon gairdneri）拉丁名为Oncorhynchus mykiss，属鲑形目（Salmoniformes）、鲑科（Salmonidae）、太平洋鲑属（Oncorhynchus），原产于美国阿拉斯加的kuskokwin河和加拿大不列颠哥伦比亚省的和平河等水域，属于冷水性鱼类。硬头蹲和虹鳟同为一种，虹鳟为路封型，硬头鳟为洄游型（广盐性），经过选育、驯化，改变了洄游习性，可终生生活于淡水中。国内最早是北京康鑫水产公司于1998年从美国引进全雌发眼卵，开始养殖硬头鳟。硬头鳟的肉色和肉质优于虹鳟，在饲料利用率、抗病力等生产性能方面也明显强于虹鳟，生长速度比虹鳟快10%～20%，尤其体重大于250 g以后，生长优势更为明显。硬头鳟最佳生长水温为10～18 ℃，低于8 ℃或高于22 ℃都会影响其摄食及生长，与虹鳟相同。硬头鳟引进、养殖时间不长，种质还未发现明显退化，养殖效果较好，受到养殖户的青睐，是冷水鱼主要养殖品种——虹鳟的替代品种，为处于困境的虹鳟鱼养殖业带来了希望，推广前景广阔。
由于硬头鳟众多优势，许多科研单位对其进行科学研究，特别是对于胚后从初孵仔鱼到上浮仔鱼并未见报道，该阶段被称为仔鱼早期，其形态建成与分化较快。早期仔鱼对环境的适应能力还很弱，对环境的变化非常敏感，该养殖阶段对硬头鳟的成活率有着至关重要的作用。因此，我们对仔鱼早期发育进行了观察，以了解其早期发育过程中形态发育特点，明确各器官形成的关键期，分析其器官形成与早期环境相适应的特点，用于指导生产。
1材料与方法
1.1材料
硬头鳟受精卵为丰宁天河龙养殖有限公司2013年12月25日人工受精卵，放在塑料桶内，水温5～6 ℃，经过370 ℃·d，74 d孵化，2014年3月9日开始破膜。
1.2饲养条件。
出膜后的仔鱼饲养在直径为2 m的圆形孵化缸内，水源为地下水，水温6.2 ℃，采用微流水，水量为每min 8～10 L，每天用电子比色检测仪检测水质，溶氧大于6 mg/L，pH 7.2。鱼卵开始出现破膜仔鱼时，应加强检查，及时清除卵皮和死鱼，注意饲育环境的清洁卫生，经常刷洗槽孔，保持水流畅通。
1.3方法
仔鱼出膜当天记为 0日龄，从 0日龄开始每天随机抽取 30尾鱼作为观察材料，用电子数显卡尺测量卵黄囊仔鱼全长及卵黄囊大小，用SZ760连续变倍体视显微镜观察、进行拍照记录，见表1。
2结果
2.1形态观察
硬头鳟早期仔鱼为刚破膜到上浮仔鱼期间，此阶段仔鱼靠卵黄囊生长，为内源性营养期；从破膜到上浮经过38 d，开口摄食，进入晚期仔鱼阶段。
表1卵黄囊仔鱼发育期外形变化
72.40%2.1.1初孵仔鱼刚破膜的仔鱼全长16.06 mm，卵黄囊长径6.77 mm，短径5.26 mm。全身透明，卵黄囊呈椭圆形；身体为弧形，头部较小并向腹面弯曲，鳃裂形成，卵黄囊血管清晰，脊柱也呈弧形弯曲，并在尾部稍向背面弯曲；心脏为管状，在卵黄囊腹面靠前的部位。仔鱼眼球黑色，肛门位于鱼体后1/3处，直肠管状，仔鱼健壮，匍匐于水底，受刺激游动。鳍膜发达，背鳍、臀鳍、尾鳍鳍膜连成一片，背鳍膜起始于头后部，臀鳍膜起始于卵黄囊后。尾部鳍褶宽大，呈扇形，为刚出膜仔鱼主要的运动器官（图1a）。
2.1.21～3日龄全长16.58 mm，卵黄囊长径6.41 mm、短径5.05 mm。头部及背部黑色素密集，色素细胞为点状、星芒状，仔鱼的身体逐渐伸直，头部增大并隆起，整个眼睛呈黑色。鳃比较明显，开始分化，卵黄囊上有一粗血管，周围密布发达的毛细血管网，出现口裂。仔鱼匍匐于水底，少游动（图1b）。
2.1.36日龄全长18.23 mm，卵黄囊长径619 mm、短径4.66 mm。仔鱼视网膜着色，眼球色素增多，出现鼻囊，鳍褶出现，形成鳍条但不明显，心跳比较明显，达到74次/min。卵黄囊逐渐被吸收，油球因为被吸收而变小。卵黄囊上色素沉积较多，仔鱼尾部也开始沉积色素。尾鳍鳍膜中密布毛细血管网；腹鳍原基开始出现（图1c）。
2.1.410日龄全长19.36 mm，卵黄囊长径6.01 mm、短径4.60 mm。眼晶体明显，眼部增厚，鳃丝露出鳃盖，并可见鳃中有淡红色的血液流动，说明鳃开始具有呼吸能力，卵黄囊腹部凹陷。头部、第一背鳍、第二背鳍间鳍膜消失，第一背鳍独立出来；体腔黄色，空腔，体腔上方可见黑色组织器官；仔鱼体色变深，头部色素点密集，色素点背部较密，鳍褶比较明显，鳍条清晰，开始充血（图1d）。
2.1.515日龄全长20.27 mm，卵黄囊长径5.89 mm、短径4.21 mm。仔鱼口开启，心脏弯曲，心跳次数达到80次/min，血流清晰可见，心脏和主动脉中充满淡红色血液。第一背鳍基部出现雪花状黑色素点扩散，背鳍与尾鳍之间的鳍褶逐渐退化，两者之间的界限逐渐明显；各鳍条上均有黑色素点和黄色素点，仔鱼头部逐渐变宽，头盖骨隆起。（图1e）
2.1.620日龄全长21.58 mm，卵黄囊长径5.49 mm、短径3.84 mm。两个鼻孔比较明显，下颌可动，吻端比较明显，体色素加深，黑色素点密布全身，背部、腹部均有；肝脏出现，卵黄囊后方十二指肠部分明显变小，并可见其内金黄色的油滴；鱼体斑点由黑色素聚集而成，腹部卵黄囊已经接近消失。腹鳍出现鳍条，全身除腹鳍膜未消失外，其余鳍膜都已消失。仔鱼从腹部贴于水底，不再侧卧，背鳍、尾鳍、腹鳍分化明显，游泳能力增强（图1f）。
2.1.726日龄全长22.15 mm，卵黄囊长径5.19 mm、短径3.37 mm，卵黄囊明显缩小。鱼体全身呈黑色，仔鱼能平衡游泳，鱼鳔已形成。出现支鳍软骨，胸鳍向后伸展，色素点在尾鳍上、下端边缘最多，聚集成片 （图1g） 。
2.1.832日龄全长23.24 mm，卵黄囊长径4.75 mm、短径2.81 mm。整个眼睛的视网膜部分呈金色，卵黄囊吸收完毕，肠内仍有黄色油滴，胎粪也开始排出，身体开始变粗，此时仔鱼为内外混合营养期，仔鱼能平衡游泳。身体侧面出现大小不一的斑点，侧线附近斑点较大，靠近背部斑点较小。第一背鳍前端黑色，鳍条上有黑色素（图1h）。
2.1.938日龄全长24.62 mm，卵黄囊长径4.55 mm、短径2.16 mm。身体色素增强，鳃盖形成，肠管贯通，鳔充气，运动能力增强，可作长时间游泳，不再停留水底。第一背鳍上黑色素点逐渐变多，红色素逐渐减少，鱼体腹部鳞片覆盖基本完成。身体变粗，嘴前凸，头变窄，外形逐渐接近成鱼（图1i）。图1硬头鳟卵到仔鱼的各期发育形态3分析与讨论
3.1温度对卵黄囊仔鱼发育的影响
硬头鳟早期仔鱼是指破膜至上浮这一阶段的仔鱼，此时仔鱼靠卵黄囊提供营养，为内源性营养期，因此又称为卵黄囊仔鱼，早期仔鱼主要进行感觉、摄食、呼吸和游泳等器官分化。初孵仔鱼卵黄囊较大，是仔鱼发育所需能量的主要来源，此时的仔鱼没有摄食能力，不能获得外源性营养，随着仔鱼的发育卵黄囊逐渐被吸收变小，卵黄营养对于仔鱼的发育和生存具有非常重要的意义。仔鱼上浮后开口摄食，主要器官发育和形态变异完成，即进入晚期仔鱼阶段，此时为混合营养期，卵黄囊吸收完毕后即进入外源性营养期。
本研究证明，水温6.11 ℃时从破膜到上浮仔鱼需经过35 d，水温10～11 ℃时只需12 d。承德试验基地水温较低，硬头鳟早期仔鱼发育时间长，卵黄囊吸收慢，器官发育慢，两三天内变化不明显。在苗种培育生产中，应根据以上规律，在早期仔鱼阶段尽量为其创造良好的发育条件，使其各功能器官均衡发育，保证其顺利开口。
3.2硬头鳟早期仔鱼卵黄囊吸收特点
硬头鳟早期仔鱼发育时卵黄囊变化具以下特点：
短径缩减远远大于长径，比长径快近一倍（图2）；体积缩减最快，到上浮时只剩初孵仔鱼的1233%，面积缩减次之，剩原来的27.60%（图3图2硬头鳟早期仔鱼卵黄囊大小的变化
图3硬头鳟早期仔鱼卵黄囊体积、面积变化硬头鳟仔鱼个体相对较大，生长迅速，到上浮开口时全长已经近25 mm，因此适应环境的能力较强，苗种培育成活率较高。尤其在承德基地环境温度较低的情况下，挑选个体相对较大的鱼作为亲鱼，所产卵卵径也会较大，初孵仔鱼生长迅速，适应环境的能力较强，对降低苗种开口饵料人工驯化难度，提高苗种成活率具有重要意义。
4小结
通过对硬头鳟卵黄囊仔鱼发育观察，仔鱼早期形态建成与分化较快，卵黄囊仔鱼的感觉、摄食、呼吸、游泳等器官快速分化，但其对环境的适应能力还很弱，对环境变化非常敏感，因此，对仔鱼早期发育进行观察，了解其发育过程中形态发育特点，明确各器官形成的关键期，对于指导生产，提高苗种早期发育成活率具有重要意义。
