粮食中玉米赤霉烯酮含量的测定

    路峰 王烽凡

    

    

    

    【摘? ?要】 本文通过使用超高效的液相色谱仪建立了一种测定玉米赤霉烯酮在粮食中含量的方法。实验结果显示：在浓度范围 10 μg/L～500 μg/L 内，校准曲线相关系数为 0.9998;进样量2μL，仪器检出限为1.5μg/L，定量限为5μg/L。三个浓度下标准品的保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.03～0.15%和 0.28～1.71%之间;玉米样品平均加标回收率为92.7%～104.0%。该方法简便快速，且易操作。

    【关键词】 玉米赤霉烯酮;粮食;超高效液相色谱

    [Abstract] A method for the determination of zearalenone in grain by ultra performance liquid chromatograph was developed. The results show that the correlation coefficient of? standard curve is 0.9998 in the concentration range of 10 μg/L-500 μg/L，sample size is 2μL， limit of instrumental detection is 1.5 μg/L，limit of quantitation is 5 g/L. The standard of retention time and peak area at three concentrations were between 0.03-0.15% and 0.28-1.71%，the average recovery rate of corn samples were 92.7%-104.0%. The method is simple， rapid and easy to operate.

    [Keywords] zearalenone;grain ultra-high performance;liquid chromatography

    玉米、燕麥、小米、大米、小麦、大麦等谷物是玉米赤霉烯酮的主要污染对象，有较强的耐热性，还具有可在生殖系统上起作用的雌激素作用，能同时使家禽、实验小鼠及家畜产生激素亢进症。孕妇食用的食品中若含有玉米赤霉烯酮将会引起畸形、死胎及流产。用于制作各种面食的面粉中若含有玉米赤霉烯酮，将会对被食用者的中枢神经系统产生中毒症状，如头痛、恶心及神经抑郁等[1]。目前用于检测该真菌毒素的分析方法有很多，本文采用高效液相色谱法，本文参照 GB/T 5009.209-2008，分析了玉米中的玉米赤霉烯酮，得到了令人满意的分析结果。

    1? 实验条件

    1.1? 仪器

    本实验应用的是岛津型号为LC-30A的超高效液相色谱仪，使用二元高压梯度系统。详细配置：， CBM-20A 系 统 控制器， SIL-30AC自动进样器，LabSolutions Ver.5.42SP3色谱工作站，DGU-20A5R 在线脱气机，CTO-30A 柱温箱，LC-30AD输液泵，RF-20AXS荧 光 检 测 器。

    1.2? 实验分析条件[2]，[3]

    流动相：乙腈+水+甲醇（40+53+7）混合，并脱气;进样体积：2 μL;检测波长：Ex=305 nm，Em=460 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：40℃;洗脱方式：等度洗脱;色 谱 柱 ： Shim-pack XR-ODS II 2.2 μm ，75 mm L× 3.0mmI.D.。

    1.3? 样品制备

    1.3.1 标准溶液配制? ? 用乙腈作溶剂将适量准确称取的玉米赤霉烯酮的标准品配制成0.1 mg/mL浓度的标准储备液，并避光放置于4℃的冰箱中保存。用流动相将玉米赤霉烯酮标准储备液稀释成标准工作溶液，浓度为 10 μg/L、20μg/L、50 μg/L、100 μg/ L、200 μg/ L、500 μg/L。

    1.3.2? 样品前处理方法? ? 参照GB/T 5009.209-2008，对样品进行前处理。

    2? 实验结果

    2.1? 标准工作液的线性关系

    按1.2所述的条件对所配制的不同浓度玉米赤霉烯酮的标准工作液进行测定。标准曲线方程和相关系数结果见表 1。

    2.2? 仪器的定量限及检出限

    仪器的灵敏度是结合标曲中出现的最低点（10 μg/L）计算的，仪器的定量限是按噪声的十倍计算（5μg/L），检出限是按噪声的三倍计算（1.5μg/L），图1 所示为其色谱图。

    2.3? 精密度的实验

    选用高、低、中三个浓度不同的标准液，分别分六次平行进样，目标物的峰面积及保留时间的RSD%分别在0.28～1.71%和0.03～0.15%，仪器具有良好的精密度（见表2）。

    2.4? 基质加标实验

    按照GB/T 5009.209-2008对玉米样品进行处理，上机测试，未有玉米赤霉烯酮被检出。对添加标样的玉米样品，分五次平行进样。基质加标回收结果如表3 所示。

    3? 结论

    本文通过使用超高效的液相色谱仪建立了一种测定玉米赤霉烯酮在粮食中含量的方法。实验结果显示：方法具有良好的重复性、线性和灵敏度，可以满足分析此种毒素的要求。

    参考文献：

    [1] 罗小虎，包清彬，杨潇，等.高效液相色谱法测定玉米赤霉烯酮的方法研究[J].食品科技，2010，35（1）：266—270.

    [2] 刘胜利，王莹，何成华，等.玉米赤霉烯酮的高效液相色谱-荧光法检测技术研究[J].南京农业大学学报，2011，34（6）：100—104.■