银鱼中亚硝酸盐的测定

    陈一虎

    摘 要：以离子色谱法测定地产银鱼中亚硝酸盐的含量，兼具选择性好、灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性;所得结果低于国标的含量限制，符合食品安全要求。

    关键词：离子色谱;银鱼;亚硝酸盐

    亚硝酸盐是一种广泛存在于水体、蔬菜、加工食品等物质中的有害化学成份， 对人体具有一定的危害性。联合国粮农及世界卫生组织专门委员会认为亚硝酸盐的日摄入量应小于20 mg。国内外已报道测定亚硝酸盐的方法有光度法、极谱法、流动注射分析光度法、催化电位法等[1-3]。

    太湖银鱼与松江鲈鱼、黄河鲤鱼、长江鲥鱼，并称中国四大名鱼。它营养丰富，肉质细腻，洁白鲜嫩，无鳞无刺，无骨无肠，无腥，含多种营养成分。姚可成在《食物本草》中评价之为“利水，润肺，止咳”，《医林纂要》中也有“补肺清金，滋阴，补虚劳”之说。

    离子色谱法可用于对啤酒、白酒、蔬菜等样品中常见无机阴离子的测定，欧盟将离子色谱法规定为肉制品中亚硝酸盐检测的标准方法。而用于对银鱼样品中亚硝酸盐含量的测定，则尚未见诸报道。试样经粉碎，沉淀蛋白质、除去脂肪和净化后，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离后进行定量，具有选择性好，灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性。

    1 仪器试剂

    1.1 仪器

    离子色谱仪（ZCS-1100）;超声波清洗仪;022 μm 水性滤膜针头滤器;净化柱。

    1.2 试剂

    超纯水（电阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-标准液（1 000 mg/L，水基体）;NO3-标准液（1 000 mg/L，水基体）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合标准使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

    2 实验部分

    2.1 色谱条件

    色谱柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（带IonPac AG11-HC 型保护柱4 mm×50 mm）。

    流动相：DionexEG50自动淋洗发生器，OH-型。

    淋洗液：氢氧化钾，浓度为20 mmol，等度洗脱。

    抑制器：DionexASRS 4 mm阴离子抑制剂，外加水抑制模式，抑制电流100 mA。

    检测器：电导检测器，检测池温度为 30 ℃。

    进样体积：25 μL。

    2.2 标准曲线

    表1 标准曲线配制

    进样序号

    保留时间

    /min

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高/μS

    ST1

    6.014

    0.023

    0.125

    ST2

    6.014

    0.038 9

    0.215

    ST5

    6.014

    0.101 2

    0.567

    ST10

    6.017

    0.207 7

    1.173

    ST20

    6.007

    0.433 5

    2.447

    移取亚硝酸盐标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，含亚硝酸根离子浓度为0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，从低到高浓度依次进样，得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以亚硝酸根离子浓度（mg/L）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线[4]。结果见表1、图1、图2。

    图1 标准曲线（Correlation coefficient：0.998 9）

    图2 NO2- 浓度为0.5 mg/L时色谱图

    2.3 实验步骤

    用天平称取样品，破碎，加入少量二次水，超声使充分溶解，经沉淀蛋白质、除去脂肪后，将上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混匀后过C18柱后过0.22 μm水性滤膜针头滤器，弃去初滤液，使用离子色谱仪，外标法测得亚硝酸盐的含量。

    2.4 样品检测与结果分析

    依据前述方法，对银鱼样品进行测定，所得结果见图3、表2。

    图3 银鱼NO2-浓度色谱图

    表2 银鱼制品NO2-浓度峰积分报告

    序

    号

    保留时

    间/min

    峰

    名称

    峰面

    积/μS

    ·min-1

    样品

    量/mg

    ·kg-1

    Average

    /mg

    ·kg-1

    RSD

    /%

    1

    5.82

    NO2-

    0.078

    0.366 4

    2

    5.82

    NO2-

    0.082

    0.385 9

    3

    5.82

    NO2-

    0.081

    0.381 0

    4

    5.82

    NO2-

    0.079

    0.371 30.3762.0

    对银鱼样品中亚硝酸盐含量进行检测，平均含量为为0.376 2 mg/kg，而我国强制性卫生标准中规定肉类食品中亚硝酸盐的残留量不得超过50 mg/kg，符合食品安全要求。

    2.5 可靠性试验

    2.5.1 空白测试 用二次水代替样品，其余步骤与上述实验步骤一致，得空白含量为0.011 7 mg/kg，结果见图4，表3。

    图4 空白NO2-浓度色谱图

    表3 空白NO2-浓度峰积分报告

    序号

    时间

    /min

    峰名称

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高

    /μS

    样品量/

    mg·kg-1

    1

    6.01

    NO2-

    0.003

    0.012

    0.011 7

    2.5.2 加标回收 添加标样，其余步骤与实验步骤一致，进行回收率实验，结果见图5，表4。实验的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，表明方法具有较高的准确度。

    图5 Add色谱图

    3 讨论

    本实验以地产银鱼为样品，采用离子色谱法测定亚硝酸盐的含量，结果为0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，具有较高的准确度，可以作为太湖水域的系列水产品常规监测的方法。

    参考文献：

    [1]

    中华人民共和国卫生部. GB5009.33—2010.食品安全国家标准[s].北京：中国标准出版社，2010

    [2] 郭丽娜，邢宇，胡婧.肉类制品中亚硝酸盐残留量的实验测定分析[J].科技创新导报，2013（13）：12

    [3] 周文斌.泡菜中亚硝酸盐测定方法研究[J].食品科学，2006（02）：241-243

    [4] 罗哲珠，丘婷婷，范江平，等.离子色谱法对食品中亚硝酸盐检测的研究和讨论[J].广东化工，2013（12）：81-182+195

    （收稿日期：2014-11-26）

    摘 要：以离子色谱法测定地产银鱼中亚硝酸盐的含量，兼具选择性好、灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性;所得结果低于国标的含量限制，符合食品安全要求。

    关键词：离子色谱;银鱼;亚硝酸盐

    亚硝酸盐是一种广泛存在于水体、蔬菜、加工食品等物质中的有害化学成份， 对人体具有一定的危害性。联合国粮农及世界卫生组织专门委员会认为亚硝酸盐的日摄入量应小于20 mg。国内外已报道测定亚硝酸盐的方法有光度法、极谱法、流动注射分析光度法、催化电位法等[1-3]。

    太湖银鱼与松江鲈鱼、黄河鲤鱼、长江鲥鱼，并称中国四大名鱼。它营养丰富，肉质细腻，洁白鲜嫩，无鳞无刺，无骨无肠，无腥，含多种营养成分。姚可成在《食物本草》中评价之为“利水，润肺，止咳”，《医林纂要》中也有“补肺清金，滋阴，补虚劳”之说。

    离子色谱法可用于对啤酒、白酒、蔬菜等样品中常见无机阴离子的测定，欧盟将离子色谱法规定为肉制品中亚硝酸盐检测的标准方法。而用于对银鱼样品中亚硝酸盐含量的测定，则尚未见诸报道。试样经粉碎，沉淀蛋白质、除去脂肪和净化后，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离后进行定量，具有选择性好，灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性。

    1 仪器试剂

    1.1 仪器

    离子色谱仪（ZCS-1100）;超声波清洗仪;022 μm 水性滤膜针头滤器;净化柱。

    1.2 试剂

    超纯水（电阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-标准液（1 000 mg/L，水基体）;NO3-标准液（1 000 mg/L，水基体）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合标准使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

    2 实验部分

    2.1 色谱条件

    色谱柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（带IonPac AG11-HC 型保护柱4 mm×50 mm）。

    流动相：DionexEG50自动淋洗发生器，OH-型。

    淋洗液：氢氧化钾，浓度为20 mmol，等度洗脱。

    抑制器：DionexASRS 4 mm阴离子抑制剂，外加水抑制模式，抑制电流100 mA。

    检测器：电导检测器，检测池温度为 30 ℃。

    进样体积：25 μL。

    2.2 标准曲线

    表1 标准曲线配制

    进样序号

    保留时间

    /min

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高/μS

    ST1

    6.014

    0.023

    0.125

    ST2

    6.014

    0.038 9

    0.215

    ST5

    6.014

    0.101 2

    0.567

    ST10

    6.017

    0.207 7

    1.173

    ST20

    6.007

    0.433 5

    2.447

    移取亚硝酸盐标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，含亚硝酸根离子浓度为0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，从低到高浓度依次进样，得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以亚硝酸根离子浓度（mg/L）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线[4]。结果见表1、图1、图2。

    图1 标准曲线（Correlation coefficient：0.998 9）

    图2 NO2- 浓度为0.5 mg/L时色谱图

    2.3 实验步骤

    用天平称取样品，破碎，加入少量二次水，超声使充分溶解，经沉淀蛋白质、除去脂肪后，将上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混匀后过C18柱后过0.22 μm水性滤膜针头滤器，弃去初滤液，使用离子色谱仪，外标法测得亚硝酸盐的含量。

    2.4 样品检测与结果分析

    依据前述方法，对银鱼样品进行测定，所得结果见图3、表2。

    图3 银鱼NO2-浓度色谱图

    表2 银鱼制品NO2-浓度峰积分报告

    序

    号

    保留时

    间/min

    峰

    名称

    峰面

    积/μS

    ·min-1

    样品

    量/mg

    ·kg-1

    Average

    /mg

    ·kg-1

    RSD

    /%

    1

    5.82

    NO2-

    0.078

    0.366 4

    2

    5.82

    NO2-

    0.082

    0.385 9

    3

    5.82

    NO2-

    0.081

    0.381 0

    4

    5.82

    NO2-

    0.079

    0.371 30.3762.0

    对银鱼样品中亚硝酸盐含量进行检测，平均含量为为0.376 2 mg/kg，而我国强制性卫生标准中规定肉类食品中亚硝酸盐的残留量不得超过50 mg/kg，符合食品安全要求。

    2.5 可靠性试验

    2.5.1 空白测试 用二次水代替样品，其余步骤与上述实验步骤一致，得空白含量为0.011 7 mg/kg，结果见图4，表3。

    图4 空白NO2-浓度色谱图

    表3 空白NO2-浓度峰积分报告

    序号

    时间

    /min

    峰名称

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高

    /μS

    样品量/

    mg·kg-1

    1

    6.01

    NO2-

    0.003

    0.012

    0.011 7

    2.5.2 加标回收 添加标样，其余步骤与实验步骤一致，进行回收率实验，结果见图5，表4。实验的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，表明方法具有较高的准确度。

    图5 Add色谱图

    3 讨论

    本实验以地产银鱼为样品，采用离子色谱法测定亚硝酸盐的含量，结果为0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，具有较高的准确度，可以作为太湖水域的系列水产品常规监测的方法。

    参考文献：

    [1]

    中华人民共和国卫生部. GB5009.33—2010.食品安全国家标准[s].北京：中国标准出版社，2010

    [2] 郭丽娜，邢宇，胡婧.肉类制品中亚硝酸盐残留量的实验测定分析[J].科技创新导报，2013（13）：12

    [3] 周文斌.泡菜中亚硝酸盐测定方法研究[J].食品科学，2006（02）：241-243

    [4] 罗哲珠，丘婷婷，范江平，等.离子色谱法对食品中亚硝酸盐检测的研究和讨论[J].广东化工，2013（12）：81-182+195

    （收稿日期：2014-11-26）

    摘 要：以离子色谱法测定地产银鱼中亚硝酸盐的含量，兼具选择性好、灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性;所得结果低于国标的含量限制，符合食品安全要求。

    关键词：离子色谱;银鱼;亚硝酸盐

    亚硝酸盐是一种广泛存在于水体、蔬菜、加工食品等物质中的有害化学成份， 对人体具有一定的危害性。联合国粮农及世界卫生组织专门委员会认为亚硝酸盐的日摄入量应小于20 mg。国内外已报道测定亚硝酸盐的方法有光度法、极谱法、流动注射分析光度法、催化电位法等[1-3]。

    太湖银鱼与松江鲈鱼、黄河鲤鱼、长江鲥鱼，并称中国四大名鱼。它营养丰富，肉质细腻，洁白鲜嫩，无鳞无刺，无骨无肠，无腥，含多种营养成分。姚可成在《食物本草》中评价之为“利水，润肺，止咳”，《医林纂要》中也有“补肺清金，滋阴，补虚劳”之说。

    离子色谱法可用于对啤酒、白酒、蔬菜等样品中常见无机阴离子的测定，欧盟将离子色谱法规定为肉制品中亚硝酸盐检测的标准方法。而用于对银鱼样品中亚硝酸盐含量的测定，则尚未见诸报道。试样经粉碎，沉淀蛋白质、除去脂肪和净化后，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离后进行定量，具有选择性好，灵敏度高的特点，具有较强的实用性和可操作性。

    1 仪器试剂

    1.1 仪器

    离子色谱仪（ZCS-1100）;超声波清洗仪;022 μm 水性滤膜针头滤器;净化柱。

    1.2 试剂

    超纯水（电阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-标准液（1 000 mg/L，水基体）;NO3-标准液（1 000 mg/L，水基体）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合标准使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

    2 实验部分

    2.1 色谱条件

    色谱柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（带IonPac AG11-HC 型保护柱4 mm×50 mm）。

    流动相：DionexEG50自动淋洗发生器，OH-型。

    淋洗液：氢氧化钾，浓度为20 mmol，等度洗脱。

    抑制器：DionexASRS 4 mm阴离子抑制剂，外加水抑制模式，抑制电流100 mA。

    检测器：电导检测器，检测池温度为 30 ℃。

    进样体积：25 μL。

    2.2 标准曲线

    表1 标准曲线配制

    进样序号

    保留时间

    /min

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高/μS

    ST1

    6.014

    0.023

    0.125

    ST2

    6.014

    0.038 9

    0.215

    ST5

    6.014

    0.101 2

    0.567

    ST10

    6.017

    0.207 7

    1.173

    ST20

    6.007

    0.433 5

    2.447

    移取亚硝酸盐标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，含亚硝酸根离子浓度为0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，从低到高浓度依次进样，得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以亚硝酸根离子浓度（mg/L）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线[4]。结果见表1、图1、图2。

    图1 标准曲线（Correlation coefficient：0.998 9）

    图2 NO2- 浓度为0.5 mg/L时色谱图

    2.3 实验步骤

    用天平称取样品，破碎，加入少量二次水，超声使充分溶解，经沉淀蛋白质、除去脂肪后，将上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混匀后过C18柱后过0.22 μm水性滤膜针头滤器，弃去初滤液，使用离子色谱仪，外标法测得亚硝酸盐的含量。

    2.4 样品检测与结果分析

    依据前述方法，对银鱼样品进行测定，所得结果见图3、表2。

    图3 银鱼NO2-浓度色谱图

    表2 银鱼制品NO2-浓度峰积分报告

    序

    号

    保留时

    间/min

    峰

    名称

    峰面

    积/μS

    ·min-1

    样品

    量/mg

    ·kg-1

    Average

    /mg

    ·kg-1

    RSD

    /%

    1

    5.82

    NO2-

    0.078

    0.366 4

    2

    5.82

    NO2-

    0.082

    0.385 9

    3

    5.82

    NO2-

    0.081

    0.381 0

    4

    5.82

    NO2-

    0.079

    0.371 30.3762.0

    对银鱼样品中亚硝酸盐含量进行检测，平均含量为为0.376 2 mg/kg，而我国强制性卫生标准中规定肉类食品中亚硝酸盐的残留量不得超过50 mg/kg，符合食品安全要求。

    2.5 可靠性试验

    2.5.1 空白测试 用二次水代替样品，其余步骤与上述实验步骤一致，得空白含量为0.011 7 mg/kg，结果见图4，表3。

    图4 空白NO2-浓度色谱图

    表3 空白NO2-浓度峰积分报告

    序号

    时间

    /min

    峰名称

    峰面积/

    μS·min-1

    峰高

    /μS

    样品量/

    mg·kg-1

    1

    6.01

    NO2-

    0.003

    0.012

    0.011 7

    2.5.2 加标回收 添加标样，其余步骤与实验步骤一致，进行回收率实验，结果见图5，表4。实验的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，表明方法具有较高的准确度。

    图5 Add色谱图

    3 讨论

    本实验以地产银鱼为样品，采用离子色谱法测定亚硝酸盐的含量，结果为0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率为99.56%，RSD为0.7%，具有较高的准确度，可以作为太湖水域的系列水产品常规监测的方法。

    参考文献：

    [1]

    中华人民共和国卫生部. GB5009.33—2010.食品安全国家标准[s].北京：中国标准出版社，2010

    [2] 郭丽娜，邢宇，胡婧.肉类制品中亚硝酸盐残留量的实验测定分析[J].科技创新导报，2013（13）：12

    [3] 周文斌.泡菜中亚硝酸盐测定方法研究[J].食品科学，2006（02）：241-243

    [4] 罗哲珠，丘婷婷，范江平，等.离子色谱法对食品中亚硝酸盐检测的研究和讨论[J].广东化工，2013（12）：81-182+195

    （收稿日期：2014-11-26）