多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响
庞强强等
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.
摘 要:研究了不同浓度的多酶激活剂对小白菜生长、品质及抗氧化酶活性的影响。研究结果表明,多酶激活剂处理均可提高小白菜的地上部鲜、干质量、VC和可溶性蛋白含量,降低小白菜硝酸盐含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以T2处理(800倍液)效果最佳。
关键词:小白菜;多酶激活剂;生长;品质;抗氧化酶活性
我国农业生产已进入高产、优质、高效、生态、安全阶段[1]。目前,提高作物产量的主要途径是利用优良品种、增加化肥的投入、配合优化栽培措施以及用农药防治病虫害等[2,3]。随科学技术的发展,人们根据酶学理论,研制出适用于植物的酶激活剂,可以调控植物体内的某些生理生化反应,进而达到提高作物产量及改善品质的目的。本试验所采用的植物多酶激活剂具有增产、抗病、解毒和富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体等特点,试验旨在为多酶激活剂在蔬菜生产上的应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验于2014年3月20日至5月15日在华南农业大学园艺学院试验基地进行。供试小白菜为市售四季矮脚黑叶甜白菜。 试验所用多酶激活剂为华南农业大学资环学院提供,主要成分为蛋白质(≥6%),微量、中量元素(≥2%),pH值≥3.5。
2014年3月20日播种,以珍珠岩为基质进行穴盘育苗。当幼苗3叶1心时选生长一致的健壮幼苗移至栽培袋(直径28 cm,高24 cm)中,盆中基质为泥炭∶椰糠按2∶1(体积比)的比例配制。试验共设4个多酶激活剂浓度处理,分别为0(CK)、400(T1)、800(T2)、1 200(T3)倍液,移植5 d以后进行喷施处理,对照喷施清水,其余各处理分别喷施等量相应稀释倍数的多酶激活剂液,以后每隔10 d喷1次,共喷3次,喷雾时以叶片正反两面均匀布满小液滴为准。于最后一次喷施后3 d采收取样,测定相关生长和生理指标。
1.2 测定项目及方法
地上部鲜质量用天平称量。将地上部放入烘箱中,105℃杀青 15 min,然后在80℃烘干至恒重,用万分之一分析天平称取干质量;采用李合生[4]的方法测定硝酸盐含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量,POD、CAT和SOD活性,采用黄爱缨等[5]和邓修惠等[6]的方法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性。采用李合生[4]和李军[7]的方法测定VC含量。
1.3 数据处理
试验所得数据结果采用SPSS 17.0软件进行统计分析,单因素分析采用Duncan's新复极差法,作图采用Microsoft Excel 2003软件。
2 结果与分析
2.1 多酶激活剂对小白菜生长的影响
由表1看出,与对照相比,小白菜地上部鲜质量随处理稀释倍数的加大呈先升高后降低的趋势。在T2处理时地上部鲜质量最高,比对照显著增加了33.63%;T1和T3处理小白菜地上部鲜质量分别比对照增加了17.17%和7.83%,但差异不显著。小白菜干质量与鲜质量变化趋势相同,地上部干质量在T2处理时最高,T3处理时最低,但各处理间差异均不显著。
2.2 多酶激活剂对小白菜营养品质的影响
由表2可知,与对照相比,各浓度处理均可降低小白菜硝酸盐含量,除T2处理显著降低40.21%外,T1和T3处理分别比对照降低了13.71%和9.71%,但差异均不显著。VC含量在T2处理时最高,比对照显著增加了76.19%,T1和T3处理也均高于对照,分别比对照增加52.38%和19.05%,但差异不显著。多酶激活剂处理的可溶性糖含量除T3处理显著低于对照外,其他处理与对照相比差异均不显著。多酶激活剂处理的小白菜可溶性蛋白含量均显著高于对照,其中T2处理含量最高,比对照增加了36.57%,T1和T3处理分别比对照增加了10.70%和11.94%。
2.3 多酶激活剂对小白菜体内抗氧化酶活性的影响
由表3可知,多酶激活剂各处理POD、SOD、CAT和GSH-Px活性均高于对照,但不同处理提高程度有所不同,除T1处理的POD活性和T3处理的SOD活性与对照相比差异不显著外,其余处理差异均显著。与对照相比,各处理的CAT活性增幅为47.11%~70.42%,T3处理的CAT活性最高,但与T2处理差异不显著。POD活性呈现先增加后降低趋势,但所有处理均高于对照,增幅为12.76%~25.54%,其中T2处理活性最高。各处理SOD活性与对照相比分别提高了17.00%、31.60%和1.48%,T2处理最高。多酶激活剂各处理均显著提高了小白菜GSH-Px活性,增幅为72.12%~104.33%,T1处理活性最大,但与T2、T3处理差异不显著。
3 讨论与结论
生物体内一切生理生化反应都是在酶的作用下进行的。许多酶在进行催化反应时需要有些物质存在,使其激活或增加其活性,这些物质统称为激活剂(或活化剂)[8]。激活剂包括无机离子、辅酶或辅基以及一些大分子蛋白等。本试验所用的多酶激活剂含有蛋白质和一些中微量元素。本试验结果表明,小白菜施用多酶激活剂后,可增加小白菜的产量并改善小白菜品质,其中T2处理(800倍稀释液)增产和改善品质的效果最佳。
SOD、POD和CAT是植物抗氧化物酶,是防御膜脂过氧化的主要酶[9],主要作用是清除植株体内的活性氧自由基,当其作用失衡时会导致膜脂过氧化产物的积累。SOD主要作用是将超氧化物催化分解为基态氧和H2O2,产生的H2O2主要由POD和CAT清除。GSH-Px 是生物体内重要的含硒抗氧化酶[10],它能将脂质过氧化物和过氧化氢还原成相应的醇和水,并与VE协同作用,阻止脂质过氧化的链式反应,具有抗氧化功能,可保护细胞膜免受过氧化物的刺激和损伤。当GSH-Px的活性受抑制后,GSH-Px的底物——脂质过氧化物则在体内堆积,导致细胞损害[11]。本试验所用的多酶激活剂富含SOD、POD、CAT和GSH-Px 4种酶的受体,可激活这4种酶的活性。本试验研究发现,当叶面喷施该激活剂后,小白菜中这4种酶的活性均不同程度增加,其中CAT和GSH-Px活性最大增幅分别高达70.42%和104.33%。
综上所述,多酶激活剂对小白菜产量和品质具有明显的促进作用,并且对小白菜抗氧化酶(SOD、POD、CAT、GSH-Px)活性具有显著影响,本试验中以T2(800倍稀释液)处理效果最佳。
参考文献
[1] 汪家铭.新型肥料开发进展[J].化学工业,2012(9):26-32.
[2] 梅绍祥,杨映环,何庆元.作物产量的遗传基础和实现产量突破的途径研究[J].安徽农业科学,2012,40(13):7 665-
7 668.
[3] 王香芝.提高作物产量的途径[J].农技服务,2009,26(6):12-13.
[4] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:高等教育出版社,2000.
[5] 黄爱缨,吴珍龄.水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J].西南农业大学学报,1999,21(4):24-27.
[6] 邓修惠,黄学梅,李伟道,等.改良DTNB比色法测定血清GSH-Px活力[J].重庆医学,2000,29(5):445.
[7] 李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,
21(8):42-45.
[8] 陈贵,谢甫绨,王海英,等.SN-924酶激活剂在大豆上的应用效果分析[J].沈阳农业大学学报,1999,30(2):122-124.
[9] Apel K, Hirt H. Reactive oxygen species: metabolism, oxidative stress, and singnal transduction[J]. Annual Review of Plant Biology, 2004(55): 373-399.
[10] 宋增廷,姜宁,张爱忠,等.谷胱甘肽生物学功能的研究进展[J].饲料研究,2008(9):25-27.
[11] Arthur J R. The glutathione peroxidases[J]. Celluar and Molecular Life Sciences, 2000(57): 1 825-1 835.