海洋经济生物标本的采集制作和保存
周银环+黄海立
DOI:10.3969/j.issn.1004-6755.2014.06.020
摘 要：海洋经济生物标本是高校、科研院所从事相关海洋生物学教学与研究的重要材料。以藻类、鱼类、贝类、甲壳类等为例，提出标本采集前应明确的几个问题，阐述了海洋经济生物标本采集方法、制作流程、药品配制、科学保存和维护技术等。
关键词：海洋经济生物标本；采集；制作；保存
中图分类号：Q9 文献标识码：A
海洋生物标本是研究海洋资源和生态方面的重要实验材料和实验对象，是海洋生物学、水产养殖学及其他相关学科教学、科研、科普等的基础，同时一件制作精美的生物标本也是一个有价值的工艺美术品，具有很高的观赏价值。海洋生物标本的采集、制作和保存技术已成为相关学科教学科研中的一个重要环节。针对某种水生生物标本的制作和保存技术有较多的论述[1-8]，但海洋生物有其自身的特性，并且种类繁多，不同种类，其标本制作和处理的方法亦不相同，并且其标本的采集有自身的要求，本文就一些具代表性的海洋藻类和动物的采集、制作及保存技术进行阐述。
1 海洋生物的采集
海洋生物采集是标本制作的基础，海洋生物具有独特的生活环境、生活习性，因而采集之前首先要明确下述几个问题。
1.1 选择好采集地点
了解所采集海洋生物资源的分布情况，海洋生物地域分布特征比较显著，不同海域、同一海域深海区、浅海区、近岸带、潮下带、潮间带、潮上带分布不同的生物，只有掌握了其分布的情况，才能做到有的放矢。
1.2 选择好采集时间
很多海洋生物生活都具有季节性，不同季节和水温海洋生物处于不同的生长阶段，比如要采集繁殖期的生物样本首先要了解其繁殖季节，尤其对于海洋藻类而言，水温升高导致其成体死亡，只能通过孢子度夏，当水温降低到其适宜的时候才会萌发生长，并且多种海藻类其幼体和成体的形态差别比较大，所以采集时间的选择非常重要。海洋生物资源的采集不但注意季节的变化，还要注意潮汐的变化，一是因为不同的海洋生物生活在水深不同的海区，潮汐的变化影响采集的难易程度，二是潮汐的变化影响出行的时间。
1.3 了解采集对象生活和生理习性
不同的海洋生物生活习性有很大的不同，比如一些微藻类在水层的分布情况，是营浮游生活还是底栖生活，贝类是固着还是掘洞生活等。另外，一些海洋生物人接触后有毒害作用，采集前要做好防范措施。
1.4 配备合适的采集设备和工具
根据不同海洋生物生活环境和生活习性配备不同的采集设备和工具，一些海洋生物生活在较深的水层，需要有潜水人员和潜水器材，一些海洋生物固着或掘洞生活，采集需配备合适的工具，深海海域生活的海洋生物采集要随船而行。
1.5 不同种类的采集
1.5.1 海藻标本采集 海藻大多生活在潮间带，所以一般选在每月最低潮时采集。采集前要准备大量的工具，李宝华[1]等采集的工具是海藻采集中所通用的。采集时首先要选择完整的藻体，海藻多数营固着生活，都有一个固着基，采集时用刀、铲、镊子等把藻从固着基上取下来。采集过程中要保持固着基的完整，如果是藻类繁殖季节，应选择有生殖器官的藻体，而且注意雌雄都要采集。采集时注意观察海藻的自然生态，对各种海藻的生长基质、潮位、周围环境、海水温度以及海藻的数量等都要进行祥细记录。
1.5.2 贝类标本采集 贝类大多数生活在潮间带，在退潮后可以下海采集，一是可以在沙滩采集潮水推上来的贝壳，二是可以用工具采集一些生活的贝类，如附着在岩石、珊瑚礁上面的贝类，凿穴生活的种类等。一些在远海游泳的头足类，可以随船出海采集或在市场购买。
1.5.3 鱼类、甲壳类标本采集 一些有经济价值的鱼类和甲壳类大多可在市场购得，其他一些游泳种类可以随船出海，利用各种渔具捕捞。一些穴居的种类可以潜水采取，在潮间带生活的蟹类可以直接抓取，潮间带掘穴生活的种类通过工具挖掘采集。
1.5.4 其他海洋生物的采集 这里主要指腔肠动物、棘皮动物、星虫动物门、环节动物门等。海绵动物成体全部营固着和附着生活，多数附着于水中的岩石、贝壳、水生植物或其他物体上。腔肠动物门水螅、珊瑚多数固着生活，水母是浮游生活。环节动物沙蚕、星虫生活在潮间带，棘皮动物海参、 海胆、海星等营底栖生活。可根据每种海洋生物的习性进行采集。
需要指出的是，海洋生物标本采集过程中，要注意对生态和环境的保护。采集样品不能过于频繁，不能一次把某地的样品都采干，要保留繁殖的成体，保护好幼体。采集时要做好详细记录，分类保存，对每种标本要编号，记录采集日期、产地、水温气温、种名、色泽、生活环境和习性等。
2 海洋生物标本的制作
生物标本的制作方法主要有6种：浸制法、干制法、剥制法、虫蚀法、剔除法、整装制片法[9]。前4种都是海产经济生物标本制作常用的方法。
海洋生物标本制作之前首先要选择完整的标本，然后用洁净的海水清洗干净，浸制法固定时最好用海水，这样有利于标本的保存。标本体积一般不超过固定液容量的1/2～2/3，整个标本固定好后体积不超过容器的2/3。
2.1 海藻标本的制作
海藻标本的制作有两种方法，一是浸制法，二是干制法即腊叶标本法。
2.1.1 浸制标本制作 S浸制法根据不同的藻类采用不同的固定液：褐藻和蓝藻采用海水95%，甲醛 5%；绿藻采用海水80%，甲醛5%，酒精10%，饱和硫酸铜5%；红藻为海水75%，甲醛5%，酒精10%，饱和硫酸铜5%，亚硫酸5% 。固定液配置好后倒入标本瓶中，海藻标本瓶一般用各种规格的大口瓶。李宝华等[1]建议在上述溶液内加少许小苏打，以中和福尔马林分解出的乙酸。少数重要标本可加1%的甘油，以防止固定液蒸发而引起的组织破坏。
2.1.2 腊叶标本的制作 首先准备好各种制作工具，如各种规格解剖盘、镊子和毛笔、吸水纸、纱布、用重磅道林纸裁剪不同规格的标本纸、标本夹、硫酸纸等。
制作中首先要根据标本大小选好标本纸，在纸背面右下角按照标本的标注方法（包括采集时间、地点、采集人、学名等）用铅笔做好记录，解剖盘中放入海水，把标本纸放入解剖盘中，取完整清洗干净的标本放入解剖盘，用镊子和毛笔把海藻在标本纸上展开整理好，沿着解剖盘的边缘轻轻拉出标本纸，此时海藻是通过水黏贴在标本纸上的，把拉出的标本纸放在适当厚度的吸水纸上，上面盖上纱布，然后再盖上吸水纸，以此类推，做多几张标本后用标本夹把一沓标本夹住，用绳子绑上固定，上面压以重物，每天更换吸水纸，并把吸水纸晒干，经过一个星期左右腊叶标本即做好。
腊叶标本做好后要进行整理，有些标本含有胶质可以黏贴在标本纸上，有些不能粘在纸上，可用适合大小的透明胶黏住。然后在每张标本上覆以硫酸纸保护。
2.2 贝类标本制作
2.2.1 浸制标本的制作 贝类的浸制标本可用5%福尔马林固定液，或70%酒精固定液。对于观察外形的贝类可以直接把贝类投入浸制液中，对于要观察触角、腹足的贝类，则需要首先把贝类麻醉，使其伸展身体，将采集到的贝类标本置入盛海水的容器中，待其充分伸展后，用1%硫酸镁麻醉后倒出海水，用10％的甲醛溶液将其杀死后，移入固定液中保存[10]。章鱼、乌贼等头足类可放入淡水中杀死，洗净污物，整理好它们的腕足后即可浸制保存。一些个体较大的贝类，为了防其腐烂，需要注射5%甲醛后再进行固定保存。
2.2.2 干制标本的制作 贝类干制标本是指去除贝类内脏后以贝壳的形式保存标本。对于直接采集的贝壳，清洗干净晾干后，可以直接分类放入标本瓶中。对于活的的贝类，可以通过水煮法取出贝肉和内脏，清洗干净晾干后分类保存在标本瓶中。有厣的贝类，应将厣取下和壳一起保存。
2.3 鱼类标本制作
鱼类标本制作有浸制法、剥制法 、骨骼法。浸制法一般保存小型的标本，剥制法和骨骼法一般保存较大的鱼类标本。
2.3.1 浸制法 浸制法用10%的甲醛或75%的酒精做保存液保存鱼类标本。首先需对标本进行清洗整理，去除体表、口腔、鳃等部位的污物及粘液，然后对鱼体进行整理，使鱼体保持自然平整姿态。一般稍大些的鱼要进行注射10%甲醛溶液，防止内脏腐烂，注射部位为腹腔及背部的肌肉，待这两部分变硬以后可以把鱼放入固定液中保存即可。
2.3.2 剥制法 剥制法即把鱼类的皮肤剥下来，通过一定的工艺展现它们生活时的体态。剥制法主要有以下几个步骤：①首先要选择新鲜、完整无损的健康鱼。②观察并记录活体鱼的外观、颜色、性别等，并用相机拍摄。测量鱼的全长、体长、体高、头长、吻长、眼径、尾柄长、体围等。③皮肤的剥离。在剥皮时应根据各种鱼类不同的形态，采用不同的切口线，尽量减少和缩短切口线[2]。一般选择在鱼类腹部中线切口，小心剔除肌肉、脂肪、内脏和骨骼，注意不要伤到皮肤，保持鳞片和鳍条的完整。④脱脂及防腐处理。为了去除不易剔除的脂肪组织，用棉花蘸取次氯酸钠饱和溶液均匀地涂于鱼皮内表面进行脱脂[3]，防腐一般用樟脑、明矾等制成粉末涂抹于鱼皮的内侧。⑤装置。用钢丝、竹、棍等做假体支撑材料，以棉花、稻草等材料填充好后进行缝合。目前也有一些新的工艺做填充材料，用拌好的石灰泥在鱼的表面涂自然晾干后，用刀从中间线竖切开石灰壳取出鱼，然后再向石灰壳内放入适量的发泡剂，合住石灰壳．过一定时间后打开石灰壳，将发泡剂去除即可[11]。⑥定型修饰，根据剥制前拍摄的活体照片，调整鱼的姿态．然后检查鱼体各部分，如有不合适的地方，可用手稍加矫正，装上相似的玻璃球作为眼睛即可。
2.3.3 骨骼法
2.3.3.1 选材 首先要选择个体大、年龄大、新鲜的鱼。
2.3.3.2 热处理 制作骨骼标本，必须要去掉皮肤和肌肉、内脏，保留骨骼和鱼鳍。处理时用开水煮烫材料，便于剔除肌肉和鱼皮肤，把水烧开，并保持沸腾状态，将鱼躯干部分浸入沸水中，先烫一侧，2 min后再烫另一侧，最后将整条鱼全部浸在水中，约1 min后捞出。
2.3.3.3 剔除肌肉 按照先躯干部，再尾部，最后处理头部和鱼鳍的顺序剔除肌肉。肌肉处理干净后，用洗洁精清洗并用自来水冲洗干净后自然风干。
2.3.3.4 脱脂处理 用95%酒精浸泡一定时间后取出自然晾干，如果骨骼仍然发黄。继续用97号汽油辅助再脱脂［4］。
2.3.3.5 整形装架 标本自然风干后，把脱落的骨骼用胶水粘好并整理，对于大型的骨骼标本要用支架固定定型。
2.4 甲壳类标本制作
2.4.1 浸制法 浸制前首先要把甲壳类麻醉或杀死，防止直接放入甲醛溶液固定时出现附肢自切现象。可用少许氯仿或乙醚放入盖盖的容器中麻醉半小时，或投入淡水中杀死，然后用10%甲醛溶液固定即可。
2.4.2 干制标本制作 个体较大的甲壳类可采用此法。方法是将10 % 的甲醛注入动物体内, 接着放入10 % 的甲醛液中浸泡6～10 h,最后晾晒干燥即可。
2.5 其他常见海洋生物标本的制作
腔肠动物和棘皮动物、星虫动物、环节动物一般采用浸制法。此类动物一般有触手或可以伸缩，为防止其身体固定时收缩，先放入新鲜海水中使其恢复自然状态，以1%的硫酸镁溶液麻醉后，用7%的甲醛将其杀死，然后移入10%的甲醛固定液中保存。
海星、海胆类动物也可制成干制标本，先把动物整形，然后放入10%甲醛固定液中浸泡6～12 h，晒干即可。
一些超大型海洋动物如鲸类、 鲨鱼类，可以制成骨骼标本或剥制标本。骨骼标本在制作过程中，对于个体大、难以处理的可采用截段的方法，一般截为3段4部分，分为头骨段、胸椎段、尾椎段以及附骨，进行处理后，再把骨骼按顺序串制[4]。剥制标本参照鱼类剥制标本制作方法。
3 海洋生物标本的保存
3.1 标本馆室的建立
为了保存好生物标本，应当建立标本馆室。标本馆室应当防晒、防霉、防腐、防潮、通风。对于标本较少，不具备建馆条件的，可建立标本室，同样要达到以上要求。对于标本种类繁多的，可建立标本馆。标本馆一般要求较低的温度和湿度，有人员流动的温度一般在18～20 ℃，没有工作人员在内工作的标本馆内应保持13～15 ℃，相对湿度控制在40%～50%时最佳[5]，可以通过安装一些设备达到以上要求。挥发的固定液及标本散发的腐败气味对人体有害，因而标本馆室要安装通风设备。
随着科技的发展，一些大型的标本馆建立了多媒体演示系统，对陈列的标本进行多视觉、全方位的多媒体演示。使用现代电子科技技术，发挥声电效果的作用，能够更好地展示生物标本的动态和背景效果，强化陈列展示内容，化平淡、单调、枯燥为生动、神奇，丰富人们的感官享受[12]。
3.2 标本的保存与维护
标本入库之前首先要建立档案，记录采集地点、制作时间，进行分类鉴定，确定学名，根据其分类地位和学名制作标签并贴好。标本的陈列一般是根据其分类系统进行排列的。凡属新种的模式种、稀有种和国家保护的一、二级物种，均应设置一专门区域展示或馆藏。
标本保存过程中要经常进行维护，对于浸制标本，要及时更换或添加保存液，以防标本露出保存液而干坏或腐烂；对于藻类腊叶标本，要保管在干燥、密封的标本柜中，入柜前要进行分类，并贴上标签，便于查找。柜内要放入樟脑等防虫剂。并做到经常更换防虫剂。一些较大或大型的干制标本、剥制标本和骨骼标本主要进行防霉工作，日常管理时应注意定期用福尔马林、高锰酸钾熏蒸或涂抹。以达到防霉的目的。
4 结语
海洋经济生物种类繁多，以上介绍的海洋生物标本的采集、制作、保存技术是目前最常用的方法，但上述的每种方法都有其不完善性。如海藻浸制标本容易褪色，对于海藻标本保色研究不多，可以借鉴植物标本保色方法进行研究[13]，随着科技的进步，目前有一些新的标本保存技术，如制作鱼类透明骨骼标本[14]、利用透明水溶性树脂包埋生物标本[15]、制作塑化标本[16-17]等，海洋生物标本制作保存可以借鉴这些方法，以完善海洋生物标本的制作保存技术，更好地发挥标本在实验教学、科学研究、学术交流、科普教育、文化传播等方面的作用。
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Sampling, processing and preservation of specimens
of marine economic organisms
ZHOU Yin
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huan1, HUANG Hai
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li2
(1.Fisheries College of Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524088,China;
2 .Zhanjiang center for Marine Technology, Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025, China )
Abstract：Marine organism specimens are important teaching and study materials for universities and institutes researchers on marine biology. In this paper, several proposals on sampling preparations of algae, fish, shellfish, crustaceans,etc were suggested. And sampling methods, processing procedure, drug preparation, conservation and preservation of marine organism specimens were also expounded.
Key words：marine economic organism specimens; sampling; processing; preservation
（收稿日期：2014-03-10）
