不同培养盘对白僵菌生产的影响
张建华 查玉平 陈京元 王义勋 赵东容 唐桂林
摘要：在白僵菌三级生产中，使用3种不同培养盘，研究其对原菌粉生产的影响。结果表明，多孔塑盘生产的原菌粉含孢量和活孢率最高，分别为12225±217亿孢子/g和9050±096%。多孔塑盘生产的原菌粉显著好于竹制簸箕和镀锌钢盘生产的原菌粉。而且多孔塑盘在通透性和操作性上具有优势，烘干所需时间最短。这说明多孔塑盘适合用于白僵菌的三级生产。
关键词：白僵菌；培养盘；工业化生产；含孢量；活孢率
中图分类号：文献标识码：A文章编号：1004-3020（2016）06-0040-03
Effect of Deferent Culture Plates on Production of Beauveria bassiana
Zhang Jianhua（1）Zha Yuping（2）Chen Jingyuan（2） Wang Yixun（2）Zhao Dongrong（1）Tang Guilin（1）
（1.Dangyang City Station for Forest Pest and Disease Control and QuarantineYichang443000；2. Hubei Academy of ForestryWuhan430075）
Abstract： In tertiary production of Beauveria bassiana， effects of three different culture plates on the raw powder production were studied. The results showed that the spore density and viabilty of the raw powder， which produced in porous plastic plates， were highest. The spore density was 122.25±2.17 billion spores/g， and viability was 90.50±0.96%. The raw powder produced in porous plastic plates significantly better than those produced in bamboo dustpan or galvanized steel plate. And porous plastic plates had advantages in permeability and workability， in which the raw powder drying needed fewest time. These showed that porous plastic plates were suitable to tertiary production of B. bassiana.
Key words：Beauveria bassiana；Culture plate；industrial production；spore density；viabilty
白僵菌屬于丝孢纲Hyphomycetale 丛梗孢目Moniliales 丛梗孢科Moniliaceae 白僵菌属Beauveria，是一类寄主范围广、致病力强的昆虫病原真菌[1]。我国已经将白僵菌广泛应用于农林害虫的防治当中，并取得了较好效果，尤其在玉米螟Ostrina furnacalis和马尾松毛虫Dendrolimus punctatus防治上，取得了令人瞩目的经济效益和生态效益[2-4]。在目前农林害虫防治中，白僵菌是应用最多的一种真菌杀虫剂。
早在上世纪70年代，我国就开始大量生产白僵菌。当时主要为固体发酵，即从一级到三级均用固体培养基进行培养[5]。到上世纪80年代，我国白僵菌生产有了较大进展， 分生孢子提取技术改进为旋风分离机等机械提取[6]。近年来，我国白僵菌生产工艺主要为液固两相发酵，利用液体发酵快速生产大量的菌丝体或芽生孢子，再转到固体营养基质上使其产生气生分生孢子[7]。其中，三级生产是白僵菌生产工艺中变革较多的一个环节，例如由土床发酵发展到浅盘发酵[7]。本文研究了白僵菌三级生产中，不同培养盘的应用对生产的影响，为改进白僵菌生产工艺，提高生产效率提供依据。
1材料与方法
1.1材料
供试培养盘为竹制簸箕、镀锌钢盘和多孔塑盘。具体参数见表1。
1.2试验方法
将同一批二级生产的菌液接种到3种不同的培养盘（各100盘）上，在相同条件下进行三级培养。检测原菌粉含孢量和活孢率，比较3种培养盘对生产其他方面的影响。试验重复4次。
1.3数据处理
采用Excel和spss20软件处理数据并绘制相关图表。
2结果与分析
2.1对原菌粉含孢量的影响
图1显示，在三级生产中使用多孔塑盘生产的原菌粉含孢量最高。本试验中，使用竹制簸箕生产的原菌粉含孢量为10425±284亿孢子/g，使用镀锌钢盘生产的原菌粉含孢量为9988±466亿孢子/g，而多孔塑盘生产的原菌粉含孢量为12225±217亿孢子/g。应用spss2.0软件进行成对样本检验，多孔塑盘生产的原菌粉含孢量显著高于竹制簸箕和镀锌钢盘生产的原菌粉含孢量（p<001）。说明培养盘的选择对于白僵菌原菌粉的含孢量影响显著。
2.2对原菌粉活孢率的影响
由图2可以看出，在三级生产中，多孔塑盘生产的原菌粉活孢率最高。本试验中，使用竹制簸箕生产的原菌粉活孢率为（8200±329）%，使用镀锌钢盘生产的原菌粉活孢率为（7863±248）%，而多孔塑盘生产的原菌粉活孢率为（9050±096）%。应用spss20软件进行成对样本检验，多孔塑盘生产的原菌粉活孢率与竹制簸箕生产的原菌粉活孢率存在显著性差异（p<005），与镀锌钢盘生产的原菌粉活孢率存在极显著性差异（p<<001）。说明培养盘的选择对于白僵菌原菌粉的活孢率影响显著。
3结论
白僵菌三级生产中，不同培养盘培养的白僵菌原菌粉的含孢量和活孢率存在显著差异。多孔塑盘培养的白僵菌原菌粉含孢量和活孢率均最高。并且多孔塑盘在通透性和操作性上也具有优势，烘干所需时间最短，培养所需时间也相对较短。因此，在白僵菌三级生产中，使用多孔塑盘既能达到提高原菌粉含孢量和活孢率的目的，又能减少生产时间和劳动强度。
参考文献
[1]高红，张冉，万永继.白僵菌的分类研究进展[J]. 蚕业科学，2011，37（4）：730736.
[2]查玉平，陈京元，夏剑萍.白僵菌防治森林害虫的研究与应用[J]. 湖北林业科技，2010，163（3）：4042，39.
[3]查玉平，胡承辉，陈京元，等. 白僵菌大面积防治马尾松毛虫效果分析[J]. 湖北林业科技，2013，42（4）：4446.
[4]陆晴，佘花娣，佟文悦.应用白僵菌防治玉米螟的研究进展[J].河北农业科学，2013，17（5）：5962.
[5]湖北省林科所. 白僵菌生产及使用技术实行规程[J]. 湖北林业科技，1979，（1）： 3436，39.
[6]李雅志，陈京元，乔永文，等. 白僵菌纯孢子粉的工业化生产及其质量研究[J]. 湖北林业科技，1989（3）：2832.
[7] 刘健，陈洪章，李佐虎.白僵菌杀虫剂生产工艺研究状况与展望[J].中国生物防治杂志，2003，19（2）：8690.
（责任编辑：夏剑萍）
摘要：在白僵菌三级生产中，使用3种不同培养盘，研究其对原菌粉生产的影响。结果表明，多孔塑盘生产的原菌粉含孢量和活孢率最高，分别为12225±217亿孢子/g和9050±096%。多孔塑盘生产的原菌粉显著好于竹制簸箕和镀锌钢盘生产的原菌粉。而且多孔塑盘在通透性和操作性上具有优势，烘干所需时间最短。这说明多孔塑盘适合用于白僵菌的三级生产。
关键词：白僵菌；培养盘；工业化生产；含孢量；活孢率
中图分类号：文献标识码：A文章编号：1004-3020（2016）06-0040-03
Effect of Deferent Culture Plates on Production of Beauveria bassiana
Zhang Jianhua（1）Zha Yuping（2）Chen Jingyuan（2） Wang Yixun（2）Zhao Dongrong（1）Tang Guilin（1）
（1.Dangyang City Station for Forest Pest and Disease Control and QuarantineYichang443000；2. Hubei Academy of ForestryWuhan430075）
Abstract： In tertiary production of Beauveria bassiana， effects of three different culture plates on the raw powder production were studied. The results showed that the spore density and viabilty of the raw powder， which produced in porous plastic plates， were highest. The spore density was 122.25±2.17 billion spores/g， and viability was 90.50±0.96%. The raw powder produced in porous plastic plates significantly better than those produced in bamboo dustpan or galvanized steel plate. And porous plastic plates had advantages in permeability and workability， in which the raw powder drying needed fewest time. These showed that porous plastic plates were suitable to tertiary production of B. bassiana.
Key words：Beauveria bassiana；Culture plate；industrial production；spore density；viabilty
白僵菌屬于丝孢纲Hyphomycetale 丛梗孢目Moniliales 丛梗孢科Moniliaceae 白僵菌属Beauveria，是一类寄主范围广、致病力强的昆虫病原真菌[1]。我国已经将白僵菌广泛应用于农林害虫的防治当中，并取得了较好效果，尤其在玉米螟Ostrina furnacalis和马尾松毛虫Dendrolimus punctatus防治上，取得了令人瞩目的经济效益和生态效益[2-4]。在目前农林害虫防治中，白僵菌是应用最多的一种真菌杀虫剂。
早在上世纪70年代，我国就开始大量生产白僵菌。当时主要为固体发酵，即从一级到三级均用固体培养基进行培养[5]。到上世纪80年代，我国白僵菌生产有了较大进展， 分生孢子提取技术改进为旋风分离机等机械提取[6]。近年来，我国白僵菌生产工艺主要为液固两相发酵，利用液体发酵快速生产大量的菌丝体或芽生孢子，再转到固体营养基质上使其产生气生分生孢子[7]。其中，三级生产是白僵菌生产工艺中变革较多的一个环节，例如由土床发酵发展到浅盘发酵[7]。本文研究了白僵菌三级生产中，不同培养盘的应用对生产的影响，为改进白僵菌生产工艺，提高生产效率提供依据。
1材料与方法
1.1材料
供试培养盘为竹制簸箕、镀锌钢盘和多孔塑盘。具体参数见表1。
1.2试验方法
将同一批二级生产的菌液接种到3种不同的培养盘（各100盘）上，在相同条件下进行三级培养。检测原菌粉含孢量和活孢率，比较3种培养盘对生产其他方面的影响。试验重复4次。
1.3数据处理
采用Excel和spss20软件处理数据并绘制相关图表。
2结果与分析
2.1对原菌粉含孢量的影响
图1显示，在三级生产中使用多孔塑盘生产的原菌粉含孢量最高。本试验中，使用竹制簸箕生产的原菌粉含孢量为10425±284亿孢子/g，使用镀锌钢盘生产的原菌粉含孢量为9988±466亿孢子/g，而多孔塑盘生产的原菌粉含孢量为12225±217亿孢子/g。应用spss2.0软件进行成对样本检验，多孔塑盘生产的原菌粉含孢量显著高于竹制簸箕和镀锌钢盘生产的原菌粉含孢量（p<001）。说明培养盘的选择对于白僵菌原菌粉的含孢量影响显著。
2.2对原菌粉活孢率的影响
由图2可以看出，在三级生产中，多孔塑盘生产的原菌粉活孢率最高。本试验中，使用竹制簸箕生产的原菌粉活孢率为（8200±329）%，使用镀锌钢盘生产的原菌粉活孢率为（7863±248）%，而多孔塑盘生产的原菌粉活孢率为（9050±096）%。应用spss20软件进行成对样本检验，多孔塑盘生产的原菌粉活孢率与竹制簸箕生产的原菌粉活孢率存在显著性差异（p<005），与镀锌钢盘生产的原菌粉活孢率存在极显著性差异（p<<001）。说明培养盘的选择对于白僵菌原菌粉的活孢率影响显著。
3结论
白僵菌三级生产中，不同培养盘培养的白僵菌原菌粉的含孢量和活孢率存在显著差异。多孔塑盘培养的白僵菌原菌粉含孢量和活孢率均最高。并且多孔塑盘在通透性和操作性上也具有优势，烘干所需时间最短，培养所需时间也相对较短。因此，在白僵菌三级生产中，使用多孔塑盘既能达到提高原菌粉含孢量和活孢率的目的，又能减少生产时间和劳动强度。
参考文献
[1]高红，张冉，万永继.白僵菌的分类研究进展[J]. 蚕业科学，2011，37（4）：730736.
[2]查玉平，陈京元，夏剑萍.白僵菌防治森林害虫的研究与应用[J]. 湖北林业科技，2010，163（3）：4042，39.
[3]查玉平，胡承辉，陈京元，等. 白僵菌大面积防治马尾松毛虫效果分析[J]. 湖北林业科技，2013，42（4）：4446.
[4]陆晴，佘花娣，佟文悦.应用白僵菌防治玉米螟的研究进展[J].河北农业科学，2013，17（5）：5962.
[5]湖北省林科所. 白僵菌生产及使用技术实行规程[J]. 湖北林业科技，1979，（1）： 3436，39.
[6]李雅志，陈京元，乔永文，等. 白僵菌纯孢子粉的工业化生产及其质量研究[J]. 湖北林业科技，1989（3）：2832.
[7] 刘健，陈洪章，李佐虎.白僵菌杀虫剂生产工艺研究状况与展望[J].中国生物防治杂志，2003，19（2）：8690.
（责任编辑：夏剑萍）
