不同储藏时间对油松种子萌发及生理特征的影响
范世奇
摘 要：油松是我国主要的造林树种，苗木需求量大。本试验以不同储藏时间油松种子为研究对象，通过常规催芽方法比较不同储藏时间油松种子的发芽及酶活性变化。结果表明：油松种子的发芽率和发芽势分别以1 a和2 a储藏时间最高，分别为89.8%和49.7%。随着油松种子储藏时间延长，种子失活严重，其中都以短时间储藏种子丙二醛含量最低，为1.77 nmol·mg-1，过氧化酶活性最高，为527.3 U·g -1FW。
关键词：油松种子；发芽率；发芽势；丙二醛；过氧化酶
中图分类号： S791.254文献标识码： A文章编号： 1004-3020（2016）02-0029-02
Abstract： Pinus tabulaeformis is the main afforestation species in China， and the demand for the seedlings is very high. We used its seeds as material to study the effects of different storage time. By conventional forced germination methods the experiment compare the change of germination and enzyme activity of its seeds through different storage time. The results showed that the germination rate and germination potential of its seeds through one-year and two-year storage time were the highest， which were 89.8% and 49.7% respectively. With the extension of the seeds storage time， seed aged seriously， and through the short time storage its seeds had the lowest content of malondialdehyde （MDA）， which was 1.77 nmol·mg-1， and the highest peroxidase enzyme activity which was 527.3 U·g-1FW.
Key words：Pinus tabulaeformis seeds； germination rate； germination potential； MDA； Peroxidase enzyme
油松Pinus tabulaeformis 又名东北黑松，广泛分布于我国北方地区。其木材坚硬、耐磨擦、耐腐力强， 是建筑、桥梁及家具等行业的重要木材。它根系发达，水源涵养性良好。生长快、耐寒、耐旱，是我国北方地区造林应用的的主要树种，也是水土保持及绿化生态的的主要树种。目前储藏时间对油松种子影响的研究报道不多， 所以本试验采用常用的催芽处理方法对不同储藏时间种子活力及酶活性变化进行比较，以期对选种及提高种子活力提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试验地点
选择采自20 a以上树龄油松的种子，种子的储藏时间分别为10 a，8 a，6 a，4 a，2 a及1 a。试验地点选择在辽宁省朝阳县某个苗圃大棚进行。
1.2 试验设计
在播种前先将称取500 g种子用温水浸泡对种子进行催芽处理：用1%高锰酸钾和硫酸亚铁溶液浸泡1～2 h，之后取出洗干净，然后用45 ℃的温水把种子浸泡24 h后取出在温暖处晾干，之后用温水浸泡重复3次，大约5 d后出现约为70%的裂嘴即可播种[～2]。
将不同储藏时间的种子播种于7 cm×14 cm的容器内（基质为拌过鸡粪的土壤），底部有空，便于排水。每个容器内播5粒种子，每个不同储藏时间的种子处理设置5个容器，每个处理重复3次，即每个处理共计15个容器。播种10 d后观察发芽数，计算发芽势。30 d后观察发芽数计算发芽率，并且将不同储藏时间的种子随机取出10粒，进行生理指标测定
1.3 项目测定
发芽率=（发芽种子粒数÷供试种子粒数）×100%[3]；
发芽势=（10天发芽种子粒数÷供试种子粒数）×100%[3]；
丙二醛（MDA）含量的测定：硫代巴比妥酸法。
过氧化物酶（POD） 酶活性测定：愈创木酚比色法。
1.4 数据处理
数据采用用Excel和Spss13.0 统计软件处理。
2 结果与分析
2.1 不同储藏时间对油松种子萌发的影响
发芽势是鉴定种子生活力的重要指标。由图1可知：种子的发芽率以储藏时间年限较短油松种子发芽率较高，1 a储藏时间种子的发芽率最高，达到89.8%，较10 a储藏时间的种子发芽率65.3%，达到显著差异（P<0.05）。由图2可知：种子的发芽势都低于50%，以1 a，2 a和4 a储藏时间的种子发芽势较高，分别为48.5%，49.7%和46.8%，三者间差异不显著（P>0.05），但是显著高于8 a和10 a储藏时间发芽势30.4%和32.3%
2.2 不同储藏时间对油松种子生理指标的影响
丙二醛 （MDA）是植物组织膜脂过氧化的产物之一，它能与蛋白质和核酸 等活性物质形成不溶性的化合物，阻碍了细胞的生命活动。研究表明种子失活与其膜脂过氧化程度大小有密切关系[4]。过氧化物酶（POD）能清除过氧化物和自由基。种子老化程度打破了防御系统的平衡，从而降低了POD活性，减弱POD的清除能力。
表1可知：随着种子储藏时间的延长，种子的老化程度加重，其活力也随之降低。种子丙二醛含量以1 a和2 a储藏时间种子含量显著高于8 a和10 a种子的丙二醛含量（P<0.05）。由于老化打破种子细胞内防御系统的平衡，POD活性随着储藏时间延长逐渐降低，以1 a和2 a储藏时间种子POD活性显著高于8 a和10 a种子POD活性（P<0.05）。
3 结论
储藏时间短的油松种子的发芽率和发芽势较好，1 a和2 a的种子发芽率和发芽势显著高于其他长时间储藏的种子，最高分别为89.8%和49.7%。种子生理变化可知，储藏时间短的油松种子丙二醛（MDA）含量显著低于储藏时间长的种子，最低为1.77 nmol·mg-1，而过氧化物酶（POD）的活力显著高于储藏时间长的种子，最高为527.3 U·g -1FW。可能由于油松种子储藏时间延长，增加了组织内部的毒害物质，而加剧了种子老化程度，而影响了种子丙二醛含量和过氧化酶活性变化[5]。
参 考 文 献
[1]郑光华.种子生理研究 [M]. 北京： 科学出版社， 2004 ： 53-60.
[2]刘思衡，曾汉章.作物种子学[M]. 福建： 科学技术出版社， 2001： 24-29.
[3]徐鹭霞.我国林木种子活力研究概述[J]. 福建林业科技， 1999， 26 ： 45-49.
[4] 邱琳， 周青. 稀土对种子萌发影响的研究进展[J]. 中国生态农业学报， 2008， 16（2）： 529-533.
[5]邱琳， 王娜， 周青. 镧对酸雨胁迫下高粱种子萌发及POD 活性和MDA 含量的影响[J]. 中国生态农业学报， 2009， 17（2）： 343-347.
（责任编辑：郑京津）
摘 要：油松是我国主要的造林树种，苗木需求量大。本试验以不同储藏时间油松种子为研究对象，通过常规催芽方法比较不同储藏时间油松种子的发芽及酶活性变化。结果表明：油松种子的发芽率和发芽势分别以1 a和2 a储藏时间最高，分别为89.8%和49.7%。随着油松种子储藏时间延长，种子失活严重，其中都以短时间储藏种子丙二醛含量最低，为1.77 nmol·mg-1，过氧化酶活性最高，为527.3 U·g -1FW。
关键词：油松种子；发芽率；发芽势；丙二醛；过氧化酶
中图分类号： S791.254文献标识码： A文章编号： 1004-3020（2016）02-0029-02
Abstract： Pinus tabulaeformis is the main afforestation species in China， and the demand for the seedlings is very high. We used its seeds as material to study the effects of different storage time. By conventional forced germination methods the experiment compare the change of germination and enzyme activity of its seeds through different storage time. The results showed that the germination rate and germination potential of its seeds through one-year and two-year storage time were the highest， which were 89.8% and 49.7% respectively. With the extension of the seeds storage time， seed aged seriously， and through the short time storage its seeds had the lowest content of malondialdehyde （MDA）， which was 1.77 nmol·mg-1， and the highest peroxidase enzyme activity which was 527.3 U·g-1FW.
Key words：Pinus tabulaeformis seeds； germination rate； germination potential； MDA； Peroxidase enzyme
油松Pinus tabulaeformis 又名东北黑松，广泛分布于我国北方地区。其木材坚硬、耐磨擦、耐腐力强， 是建筑、桥梁及家具等行业的重要木材。它根系发达，水源涵养性良好。生长快、耐寒、耐旱，是我国北方地区造林应用的的主要树种，也是水土保持及绿化生态的的主要树种。目前储藏时间对油松种子影响的研究报道不多， 所以本试验采用常用的催芽处理方法对不同储藏时间种子活力及酶活性变化进行比较，以期对选种及提高种子活力提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试验地点
选择采自20 a以上树龄油松的种子，种子的储藏时间分别为10 a，8 a，6 a，4 a，2 a及1 a。试验地点选择在辽宁省朝阳县某个苗圃大棚进行。
1.2 试验设计
在播种前先将称取500 g种子用温水浸泡对种子进行催芽处理：用1%高锰酸钾和硫酸亚铁溶液浸泡1～2 h，之后取出洗干净，然后用45 ℃的温水把种子浸泡24 h后取出在温暖处晾干，之后用温水浸泡重复3次，大约5 d后出现约为70%的裂嘴即可播种[～2]。
将不同储藏时间的种子播种于7 cm×14 cm的容器内（基质为拌过鸡粪的土壤），底部有空，便于排水。每个容器内播5粒种子，每个不同储藏时间的种子处理设置5个容器，每个处理重复3次，即每个处理共计15个容器。播种10 d后观察发芽数，计算发芽势。30 d后观察发芽数计算发芽率，并且将不同储藏时间的种子随机取出10粒，进行生理指标测定
1.3 项目测定
发芽率=（发芽种子粒数÷供试种子粒数）×100%[3]；
发芽势=（10天发芽种子粒数÷供试种子粒数）×100%[3]；
丙二醛（MDA）含量的测定：硫代巴比妥酸法。
过氧化物酶（POD） 酶活性测定：愈创木酚比色法。
1.4 数据处理
数据采用用Excel和Spss13.0 统计软件处理。
2 结果与分析
2.1 不同储藏时间对油松种子萌发的影响
发芽势是鉴定种子生活力的重要指标。由图1可知：种子的发芽率以储藏时间年限较短油松种子发芽率较高，1 a储藏时间种子的发芽率最高，达到89.8%，较10 a储藏时间的种子发芽率65.3%，达到显著差异（P<0.05）。由图2可知：种子的发芽势都低于50%，以1 a，2 a和4 a储藏时间的种子发芽势较高，分别为48.5%，49.7%和46.8%，三者间差异不显著（P>0.05），但是显著高于8 a和10 a储藏时间发芽势30.4%和32.3%
2.2 不同储藏时间对油松种子生理指标的影响
丙二醛 （MDA）是植物组织膜脂过氧化的产物之一，它能与蛋白质和核酸 等活性物质形成不溶性的化合物，阻碍了细胞的生命活动。研究表明种子失活与其膜脂过氧化程度大小有密切关系[4]。过氧化物酶（POD）能清除过氧化物和自由基。种子老化程度打破了防御系统的平衡，从而降低了POD活性，减弱POD的清除能力。
表1可知：随着种子储藏时间的延长，种子的老化程度加重，其活力也随之降低。种子丙二醛含量以1 a和2 a储藏时间种子含量显著高于8 a和10 a种子的丙二醛含量（P<0.05）。由于老化打破种子细胞内防御系统的平衡，POD活性随着储藏时间延长逐渐降低，以1 a和2 a储藏时间种子POD活性显著高于8 a和10 a种子POD活性（P<0.05）。
3 结论
储藏时间短的油松种子的发芽率和发芽势较好，1 a和2 a的种子发芽率和发芽势显著高于其他长时间储藏的种子，最高分别为89.8%和49.7%。种子生理变化可知，储藏时间短的油松种子丙二醛（MDA）含量显著低于储藏时间长的种子，最低为1.77 nmol·mg-1，而过氧化物酶（POD）的活力显著高于储藏时间长的种子，最高为527.3 U·g -1FW。可能由于油松种子储藏时间延长，增加了组织内部的毒害物质，而加剧了种子老化程度，而影响了种子丙二醛含量和过氧化酶活性变化[5]。
参 考 文 献
[1]郑光华.种子生理研究 [M]. 北京： 科学出版社， 2004 ： 53-60.
[2]刘思衡，曾汉章.作物种子学[M]. 福建： 科学技术出版社， 2001： 24-29.
[3]徐鹭霞.我国林木种子活力研究概述[J]. 福建林业科技， 1999， 26 ： 45-49.
[4] 邱琳， 周青. 稀土对种子萌发影响的研究进展[J]. 中国生态农业学报， 2008， 16（2）： 529-533.
[5]邱琳， 王娜， 周青. 镧对酸雨胁迫下高粱种子萌发及POD 活性和MDA 含量的影响[J]. 中国生态农业学报， 2009， 17（2）： 343-347.
（责任编辑：郑京津）
