犬乳腺鳞状细胞癌的病理组织学诊断
胡守明
摘要：为了确诊一例犬乳腺肿瘤的种类，试验应用石蜡切片制作技术、苏木精-伊红染色（HE），对肿瘤组织进行了病理组织学的研究。结果显示，肿瘤组织内有不同分化程度的典型癌巢出现，巢癌间可见大量炎性细胞浸润，癌腔内可见脱落的角化细胞，癌巢中棘细胞呈同心圆状排列，细胞嗜酸性增强，核浓缩及角质化程度增大，中心形成透明的强嗜酸性的角质化癌珠。经过病理组织学研究确诊该肿瘤为发生在乳腺组织的鳞状细胞癌。
关键词：犬；鳞状细胞癌；病理组织学
中图分类号：S858.292 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2018）01-0007-02
近年来，随着人们生活水平的提高，人们对精神生活的追求也越来越高，犬等宠物也在不断进入各个家庭，随着犬数量的增多各种疾病也在不断出现。其中肿瘤性疾病是危害宠物健康的重要疾病。肿瘤按照严重程度可以分为良性肿瘤与恶性肿瘤，常见的有乳腺癌、纤维瘤、眼睑腺增生、脂肪瘤、淋巴瘤、皮下鳞状细胞癌、腹腔恶性黑色素瘤、膀胱瘤、肝癌、骨肉瘤等[1]。1998年的马克·莫里斯基金会的动物健康调查的报道显示，超过2 000名被采访者阐述肿瘤是导致犬死亡的主要原因，而且全世界宠物肿瘤疾病的患病率还在逐渐上升[2]。在国内肿瘤排行中，乳腺肿瘤、皮肤肿瘤、肛周瘤、睾丸肿瘤、阴道肿瘤的发病率排行在前5位。在国外，皮肤肿瘤的发生率排在了第一位，乳腺肿瘤排在第二位[3]。乳腺肿瘤的发生率在宠物犬中发病率较高，且各个阶段均可发生，尤其以老年母犬为主，9～11岁的老龄母犬发病率最高。La等[4]调查表明，乳腺肿瘤占犬类肿瘤发病率的13.4%，有41.7%发生在子宫未摘除的母犬，而且乳腺肿瘤的最常发部位为最后一对乳腺，发病率为49.53%，其中乳腺癌又占到乳腺腫瘤的50%左右[5]。其发病原因主要是由于最后一对乳腺较为发达，乳腺的实质、间质及脂肪组织十分丰富，进而造成了疾病的多发[3，4]。肿瘤在动物机体的发病原因非常复杂，可受遗传、内外环境等因素的影响。在遗传因素中，基因突变在引起犬乳腺肿瘤的形成和发展中起主要作用，而且动物的类别、年龄、性别和机体的差异性均可引起肿瘤的发生[6]。肿瘤的发生机理是细胞生长异常、分化失控的结果，各种病因导致了细胞基因结构的改变或调控的失常。目前关于癌变机理的学说主要有基因突变学说、基因表达失调学说和癌基因学说。肿瘤的发生、发展是一个动态的变化过程，在机体本身以及各种环境因素的共同作用下，使正常的细胞形态或性质发生变化，最终产生肿瘤。2017年8宁夏某动物医院接诊到一例乳腺下长有一增生物的患犬，为了确诊增生物的类型，手术摘除后进行了病理组织学的研究。
1 材料与方法
1.1 病料
从病犬乳腺内摘除的增生物。
1.2 设备和仪器
手术刀、手术剪、镊子、托盘、标本缸、恒温箱、温度计、石蜡、石蜡切片机、水浴锅、烧杯、数码显微镜、烘片机、载玻片、盖玻片、染色缸、染色架等。
1.3 试剂
甘油、蛋清、10%福尔马林溶液、无水乙醇、二甲苯、石蜡、苏木精染色液、伊红、盐酸、中性树胶等。
1.4 方法
1.4.1 病犬的临床检查及增生物的摘除 观察病犬临床表现，测量体温、体重，取病犬左后腿静脉全血进行生化分析。B超检查，对发现的乳腺增生物进行摘除。
1.4.2 乳腺增生物的病理组织学观察 将乳腺增生组织用10%福尔马林固定7 d后，制作石蜡切片，HE染色，光学显微镜观察。
2 结果与分析
2.1 病犬的临床检查及增生物的摘除
该宠物犬8岁，重7.2 kg，宠物犬的主人观察到该犬左侧第四乳房肿胀，乳头下有肿块，表面皮肤发红，有出血现象，因此送到银川爱康动物医院进行诊疗。该犬的心率、呼吸、食欲、排粪、排尿状态无明显异常，体温38.2 ℃，经B超检查发现该犬左侧第一乳头下方及左侧第四乳头下方均有增生物，触之较硬，随即进行全血生物分析。生化分析结果显示该犬各项指标均正常，随后进行了犬的全身麻醉，手术摘除增生物（图1）。增生物位于犬第一和第四乳腺皮下乳腺组织内，还没有突破皮肤生长。第一乳腺皮下组织内组织块大小约为5 cm×4 cm；第四乳腺皮下组织内组织块大小约为12 cm×8 cm，淡红色，无包膜，外观菜花样，实质呈浸润生长，与乳腺组织融合，无明显界限；增生物质脆，切面有出血。
2.2 增生物的病理组织学观察
经过显微镜观察，发现增生物为恶性肿瘤—鳞状细胞癌。镜下可见肿瘤由间质和实质组成，实质没有明显的层次，间质的红色粗大的胶原蛋白束间有大小不等、分化程度不同的圆形、索状的癌巢（图2）；有的癌巢实心，有的空心，癌巢的细胞层次不一致，分化程度较高的癌巢中央可清楚的见到透明的和呈红色角质化的物质（图3）；癌巢之间可见炎性细胞的浸润，没有明显的出血现象。
肿瘤实质细胞主要由棘细胞样细胞构成，核密集，有的核裂解，并可见不同分化时期的鳞状细胞癌的癌巢。癌巢中分化程度高的棘细胞形成同心圆的形状，癌巢中的细胞嗜酸性明显增强，细胞核浓缩染色加深，而且角化程度明显增大，中心形成了透明的强嗜酸性的角质化癌珠。
3 讨论
结合病犬的临床症状、B超检查结果和增生物的病理组织学观察结果，最终确诊该犬乳腺部位所生长的增生物为肿瘤，该肿瘤类型为鳞状细胞癌。
鳞状细胞癌（Squamous cell carcinoma， SCC）简称鳞癌，又名表皮样癌，是起源于皮肤或黏膜棘细胞的恶性肿瘤，是一类常见的恶性肿瘤，该病的癌组织生长速度较快，而且呈乳头状生长，破溃的癌组织可形成溃疡面。该病的发生往往可基于常见的某些皮肤病发生，例如慢性溃疡性疾病、皮炎、寻常性狼疮病、慢性盘状红斑狼疮病、载膜白斑病、烧伤疤痕症状等，恶性程度较基底细胞癌高。磷状细胞癌可通过淋巴通路进行转移，进而引起其他部位也发生癌变的现象，因此该病的危害对于患犬来说是非常严重的[7]。临床上依据癌细胞的分化程度，常常把鳞状细胞癌分为三个等级：高分化鳞癌（I级）、中分化鳞癌（II级）和低分化鳞癌[8]。发生病变的高分化鳞状细胞癌组织可出现癌巢中心完全角化现象，可以形成癌珠。癌珠中心的角化物部分呈现层状结构，角化物周围依次为基底细胞样癌细胞、棘细胞样癌细胞、扁平癌细胞；发生病变的中分化鳞状细胞癌组织可出现中等细胞分化，癌巢中心有少量的角质化现象；病变的低分化鳞状细胞癌组织在癌巢内不出现角质化和无癌珠形成的病理特征[9，10]。通过观察患犬肿瘤组织切片可见有不同分化程度的典型癌巢出现，癌巢间可见较多炎性细胞浸润，癌腔中可见脱落的角化细胞，癌巢中的棘细胞呈同心圆状排列，而且癌巢中的细胞嗜酸性明显增强，核浓缩染色加深、角化程度也明显增大，癌巢中心形成了透明的强嗜酸性的角质化癌珠。因此该犬病理特征为高级分化鳞状细胞癌。
乳腺鳞状细胞癌在老年犬发病率较高，对于麻醉技术要求及麻醉设备要求更高，因此对于麻醉师和主治医师来说进行疾病的治疗具有很大的难度。虽然在临床诊断过程中，超声断层扫描和X射线检查等操作能够快速的对患犬所得疾病进行确诊，但是诊断费用较高，大多数家庭很难接受。对于病理组织学诊断，虽然组织切片的制作过程较为复杂，但是可以从根本上进行良性和恶性肿瘤的诊断，为疾病的发生机理研究做铺垫，并且便于手术后疾病治疗工作的开展。
参考文献：
[1] 俞 鹏.长沙地区犬肿瘤病的调查与分析[J].湖南农业科学，2013（24）：33-34.
[2] WITHROW S，VAIL D，RODNEY P.Withrow and MacEwen's Small Animal Clinical Oncology[M].Oxford：Elsevier LTD，2007.5.
[3] 严杜建.犬肿瘤的研究概况[J].黑龙江畜牧兽医，2016（2）：142-145.
[4] LA G M，GIAMMANCO M. Breast cancer and obesity[J].Panminerva Medica，2001，43（2）：123-133.
[5] 杨 帆，胡长敏，丁明星.7例犬乳腺肿瘤的病理组织学分析[J].畜牧与兽医，2012（S2）：122-125.
[6] 徐树明，杨晓棠，宋利平，等.乳腺鳞状细胞癌影像学及临床特征探讨[J].肿瘤研究与临床，2011，23（9）：595-597.
[7] 马永军，陈生明.牛皮肤鳞状细胞癌的病理组织学诊断[J].养殖与饲料，2011（3）：50-51.
[8] 冯爱娟，刘 耘，杨太成.鳞状细胞癌研究进展[J].广东医学，2004，25（12）：1474-1475.
[9] 张文校，郑春妹，陈 琳.一例犬乳房鳞状细胞癌的诊治[J].福建畜牧兽医，2014（2）：42-43.
[10] 刘 韬，石锦江，耿 毅，等.一例犬鳞状上皮细胞癌病理学诊断[J].黑龙江畜牧兽医，2013（4）：34-35.
