尿素氮和肌酐在不同生化检测系统上检测结果可比性探讨

    陈美珺 马泽粦

    

    【摘要】 目的 探討同一临床实验室不同检测系统间尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）检测结果的可比性，为实验室检测结果的标准化提供实验数据。

    方法 参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2文件，以Cobas 8000生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统为比较方法，以Cobas 501生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统为实验方法，用患者新鲜血清同时在两个检测系统上对BUN和Crea进行双份平行测定。计算实验方法（Y）和比较方法（X）之间的相对偏倚，以允许总误差规定的室间质量评价允许范围的1/2为标准，判断不同检测系统的可比性。

    结果 实验系统Cobas 501和比较系统Cobas 8000具有良好的相关性，除BUN其医学决定水平低值处的相对偏倚超出临床可接受范围，BUN和Crea其余测定结果在两个检测系统之间的误差均在临床可接受范围。

    结论 两个检测系统测定BUN和Crea结果具有可比性。当同一实验室同一项目在两个以上的检测系统检测时，应进行方法比对和偏倚评估，以保证同一检测项目在不同检测系统上检验结果的可比性。

    【关键词】 BUN;Crea;Cobas 8000;Cobas 501;可比性

    中图分类号：R446 ? 文献标志码：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.11.011

    【Abstract】 Objective To explore the comparability of the results of blood urea nitrogen（BUN） and creatinine （Crea） among different detection systems in the same clinical laboratory， so as to provide experimental data for the standardization of laboratory test results.

    Methods According to EP9-A2 file of National committee for Clinical Laboratory standards （ NCCLS）， the detection system composed of Roche original reagent， c.f.a.s calibrator and controller of Roche was used as comparative method， and the detection system composed of Cobas 501 biochemical analyzer， Roche original reagent， c. f. a. s calibrator and controller of Roche was used as experimental method， and two parallel measurements of BUN and Crea were performed simultaneously on two detection systems using fresh serum from patients. Then relative bias between experimental method （Y） and comparison method （X） was calculated， and the comparability of different detection systems was judged by allowing 1/2 of the range of interventricular quality evaluation specified by total allowable error.

    Results The experimental system Cobas 501 had a good correlation with comparison system Cobas 8000. Except the relative bias of BUN at the low value of medical decision level was beyond the clinical acceptable range， the errors of other detection results of BUN and Crea between the two detection systems were within clinical acceptable ranges.

    Conclusion The results of BUN and Crea determined by the two detection systems are comparable. When the same item is tested in more than two detection systems in the same laboratory， the method comparison and bias evaluation should be carried out to ensure the comparability of the detection results of the same test item on different detection systems.

    【Key words】 BUN; Crea; Cobas 8000; Cobas 501; comparability

    随着医院规模的不断扩大，许多医院同时拥有两台以上自动生化分析仪，由于不同品牌试剂和校准品不同，各自构成不同的检验系统;即使是同一公司生产的分析仪由于使用试剂和参数不同，对标本产生不同的基质效应，都会造成检测系统间偏倚的存在。这就需要通过一定的方法学比较实验对不同检测系统进行对比分析和预期偏倚评估，以确保检测结果具有连续性和一致性。尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）为两个传统的肾功能指标，其结果的准确与否影响肾脏疾病的疗效判定和监测。我们参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2[1]文件，对我院平诊和急诊Cobas 8000全自动生化分析仪与Cobas 501全自动生化分析仪进行BUN和Crea测定的方法学比较和偏倚评估，报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 仪器、试剂

    Cobas 8000生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品;Cobas 501生化分析仪、罗氏原装浓缩试剂、c.f.a.s校准品和质控品。

    1.2 标本

    以真空采血管收集本院住院患者新鲜血清，浓度覆盖医学决定水平的高、中、低值，要求无溶血、脂血、黄疸、凝块，标本量2.0～3.0 mL。

    1.3 方法学比较实验

    参照EP9-A2文件进行[1]，以Cobas 8000为比较检测系统（X），因其使用罗氏原装试剂、校准品和质控品，且多年来参与室间质评取得良好的结果。Cobas 501为我院检验科新购入生化分析仪，作为实验系统。实验前由仪器厂家专业工程师对检测系统进行校准，评价其精密度，结果显示，Cobas 8000和Cobas 501两个检测系统BUN和Crea批内精密度均<1/4允许总误差（TEa），批间精密度均<1/3 TEa。每日检测前对仪器进行常规保养、维护和质量控制，使仪器处于在控状态。

    每天收集8份标本，在两个检测系统上分别进行双份平行测定，在样本的双份测定中，指定第一次测定顺序，按反向顺序在同一个检测系统检测第二次，即为双份测定，每天的测定在2小时内完成。以上步骤重复5天。

    1.4 数据收集与处理

    剔除明确有误差的结果。（1）方法内和方法间离群值检查：首先进行方法内离群值检查，然后进行散点图和偏倚图检查，最后进行方法间离群值的检查。（2）相关分析：用相关系数r或r2粗略判断比较系统（X）的分布范围是否合理，EP9-A2文件对此做了规定，若r≥0.975或r2≥0.95，則认为X范围分布合理，直线回归统计的斜率和截距可靠。（3）线性回归统计：计算线性回归方程

    ？倴 =bX+a。通过线性方程，可以计算出相应的预期偏倚和可信区间范围、允许误差和相对误差，以1/2允许总误差规定的允许误差作为仪器比对的相对误差范围，通过比较对其临床可接受性进行评价。（4）统计学处理：所有数据均在Excel 2007和SPSS 19.0软件包上进行。不同检测系统新鲜血清测定结果的统计采用配对t检验、相关分析和回归分析。

    2 结 ?果

    2.1 离群值检查

    按EP9-A2文件的要求进行离群值检查，方法内及方法间均未发现离群值。方法间及线性评估时的散点图和偏倚图见图1、图2。

    2.2 统计分析结果

    每日随同样本一起检测的质控品LevelⅠ、LevelⅡ、Level Ⅲ均在控。配对t检验显示，Cobas 8000与Cobas 501结果比较差异无统计学意义（BUN t=0.095，P>0.05;Crea t=0.007，P>0.05）。相关分析表明，实验系统Cobas 501与参考系统Cobas 8000间的相关系数r均大于0.975，说明数据分布较好，回归方程的斜率及截距的估计较可靠，其相关分析见表1。

    2.3 临床可接受性评价

    按照1/2允许总误差允许误差的标准，BUN的允许误差为4.5%，Crea的允许误差为7.5%。Cobas 501的相对偏倚见表2。结果表明，实验系统对BUN和Crea检测结果与参考系统之间检测结果的差异，除BUN其医学决定水平低值的相对偏倚不在临床可接受范围内，BUN和Crea医学决定水平其余值均在临床可接受范围内。

    3 讨 ?论

    随着科学技术的发展及其被广泛应用于检验医学领域，同一实验室同时拥有不同的检测系统检测同一项目是普遍存在的现象[2]。不同生化检测系统对同一生化检测项目的结果是否具有可比性，能否都为临床所接受，是实验室工作人员所关注的问题。《医学实验室质量和能力认可准则》（ISO15189）中明确提出：对于使用不同程序或设备和（或）不同地点进行的检验工作，应有确定的机制在适当的临床范围来验证这些结果的可比性，这种验证应根据程序或仪器的特性定期进行;实验室应记载、记录这些比对结果，适当时对结果迅速作出反应，对存在的问题和不足应进行纠正并保留记录。

    针对我院临检中心和急诊检验科使用不同型号罗氏生化仪分别负责平诊和急诊项目的检测，我们采用EP9-A2[1]文件提供的方法，探讨BUN和Crea在Cobas 8000全自动生化分析仪与Cobas 501全自动生化分析仪上的检测结果是否具有一致性或检测结果的偏倚是否在允许误差范围内。因Cobas 8000多年来参加卫生部、省临检中心的室间质评均取得较好的结果，因此我们以其作为比较系统，而把新购买的Cobas501作为实验系统来进行研究。在本研究前对两个检测系统进行了精密度评价，各检测系统BUN和Crea批内精密度均<1/4 TEa，批间精密度均1/2允许总误差规定的允许误差，也可认为实验系统与目标检测系统具有可比性[6]。笔者认为BUN低值偏倚不可接受，其原因还有可能是当医学决定水平为低值时，绝对偏倚即使很小，但相对偏倚已经很大，引起超出临床可接受范围的假象。

    本研究显示，在Cobas 8000和Cobas 501两个检测系统上分别检测BUN和Crea两个生化项目，其相关系数r均>0.975，说明这两个系统所采用实验方法的精密度和系统间的可比性较好。但对BUN和Crea两个生化项目检测结果临床可接受性的研究，表明两个系统间存在一定的差距，说明即使室内质控CV满足要求并且相关性好，也不能证明在对病人新鲜血清检测时其结果相关性和可被接受性都满足要求。覆盖测定方法测量范围的多份患者新鲜血清是进行比对试验的最佳标本来源。

    综上所述，在医学检验实现自动化的今天，各实验室应高度重视不同分析系统之间检验结果存在是否一致性的问题，当实验室内同一检测项目在两套以上分析系统检测或使用一些新方法、试剂、仪器时，必须对其进行比对实验和偏倚评估。通过比对实验，可以发现同一实验室不同检测系统间是否具有可比性，若存在偏倚，不在临床可接受范围，必须对检测系统进行校准、溯源，必要时，在不同系统建立各自的参考区间，以保证检测结果的准确性[7～8]。

    参 考 文 献

    [1] ?KROUWER J S，THOLEN D W，GARBER C C，et al. Method of Comparision and Bais Estimation Using Patient Sample， Approved Guideline-Second Edition[J]. NCCLS， Ep9-A2， 2002，22（19）：1-57.

    [2] ?王丹晨，禹松林，尹逸丛，等.4种促甲状腺素免疫法检测系统结果的一致性评价[J].临床检验杂志，2019，37（1）：62-66.

    [3] ?U.S. Department of Health and Human Services.Medicare， Medicaid and CLIA programs; regulations implementing the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 （CLIA）--HCFA. Final rule with comment period[J]. Fed Regist，1992，57（40）：7002-7186.

    [4] ?余文辉，吴惠璇，莫其农，等.同一医疗机构不同检测系统检验结果可比性的验证与偏倚评估[J].中华临床医师杂志（电子版），2017，11（6）：931-937.

    [5] ?李佳，严翠娥，高佳，等.26项血清生化指标在2种不同生化分析系统中的检测结果可比性分析[J].中国卫生检验杂志，2017，27（14）：2066-2069.

    [6] ?王军.2种仪器和试剂测定尿肌酐对比研究及偏倚评估[J].国际检验医学杂志，2017，38（16）：2298-2299.

    [7] ?冯仁丰.临床检验管理技术基础[M].上海：上海科学文献出版社，2003：5-8.

    [8] ?刘纲毅，欧红娟，容亓.国产板式化学发光免疫分析系统与罗氏cobasE602免疫分析系统对肿瘤标志物检测结果的比对分析[J].右江医学，2017，45（3）：285-288.

    （收稿日期：2019-10-21 修回日期：2020-09-09）

    （編辑：潘明志）