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标题 大豆异黄酮对大鼠的体液免疫调节作用
范文

    郭静 周凯 蔡冬青

    

    【摘要】目的 探讨大豆异黄酮对大鼠的体液免疫调节作用。方法 80只SD雌性大鼠随机分两个实验组,每个实验组分为对照组、低剂量组(25 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、高剂量组(100 mg/kg);受试物组灌胃给予大豆异黄酮,对照组灌胃玉米油,灌胃体积均为10 ml/kg。连续灌胃15 d。进行血清溶血素测定及抗体生成细胞检测实验。结果 给予大豆异黄酮15 d后,中剂量组和高剂量组的抗体积数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三个剂量组的抗体生成数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大豆异黄酮对大鼠体液免疫调节有提高作用。

    【关键词】大豆异黄酮;大鼠;体液免疫

    【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095.6681.2020.29..02

    大豆中含有天然的活性物质—大豆异黄酮,其含量约为0.2%~0.4%,是大豆生成过程中的次级代谢产物,在自然界以游离型和糖苷型两种形式存在,具有类雌激素样作用。大豆异黄酮能治疗和预防妇女更年期综合征,对于改善更年期妇女出现的潮热、盗汗、失眠、抑郁等有显著效果[1-2]。此外,大豆异黄酮还具有较高的营养价值和药用价值,在免疫、抑制肿瘤等方面有重要作用[3]。本文研究大豆异黄酮在体液免疫调节方面的作用,为其进一步开发应用提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SD雌性大鼠80只,160~180 g,由南京中医药大学实验中心提供。实验前饲养一周。

    1.2 仪器

    全自动生化分析仪,离心机,电子天平,酶标仪,细胞培养箱等。

    1.3 受试物

    大豆异黄酮软胶囊(0.25 g/粒,推荐量每日2粒,大豆异黄酮含量22 mg/粒)。

    1.4 给药方式

    根据人体推荐量,按5倍、10倍和30倍设计,将实验大鼠随机分为两个实验组,每个实验组分为对照组、低剂量组(25 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、高剂量组(100 mg/kg),以玉米油为溶剂配制相应浓度的受试物药液,对照组灌胃玉米油,灌胃体积均为10 ml/kg。连续灌胃15 d。

    1.5 实验方法

    1.5.1 血清溶血素测定(血凝法)

    实验结束后,大鼠摘眼球取血,置于离心管内,放置1 h,剥离,离心10 min,将生理盐水稀释血清,倍比稀释,每份稀释12孔。将不同浓度的血清置于血凝板中,100 μL/孔,再加入0.5% SRBC(绵羊红细胞)悬液100 μL,混匀,37℃湿盒内放置3 h。记录每孔凝结程度,计算抗体积数。

    1.5.2 抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)

    实验结果后处死大鼠,取脾脏,搅碎过200目篩,Hanks液洗3次,用RPMI1640完全培养成5×106个/mL细胞悬液备用。在含有0.5 mL表层培养基的小试管中加入50 μL10%SRBC和20 μL已经配好的脾细胞悬液。混匀后,挂膜玻片上,凝固后培养1.5 h,在玻片架凹槽内加入SA缓冲液稀释的补体,继续培养1.5 h后,计算溶血抗体生成细胞数。

    1.6 统计学处理

    各实验组与对照组之间均数比较使用方差分析,方差不齐采用秩和检验,P<0.05有统计学意义。

    2 结 果

    2.1 大豆异黄酮对大鼠体重的影响

    给予大豆异黄酮15 d后,各组之间体重无明显差异(P>0.05),说明大豆异黄酮对大鼠体重无明显影响。结果见表1。

    2.2 大豆异黄酮对大鼠血清溶血素及抗体生成细胞的影响

    给予大豆异黄酮15 d后,中剂量组和高剂量组抗体积数明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05);三个剂量组的抗体生成数明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05),说明大豆异黄酮对大鼠体液免疫调节有提高作用。结果见表2。

    3 讨 论

    外来抗原刺激B细胞活化,B细胞在辅助性T细胞(Th细胞)的辅助下进一步活化和分化产生抗体,是免疫系统参与体液免疫应答的关键环节[4]。小鼠经绵羊红细胞免(SRBC)疫后,可刺激T细胞的活化增殖,产生SRBC特异性的细胞免疫应答。活化后的T细胞在细胞因子作用下,分化为效应细胞,产生协同刺激信号,继而激活B细胞进一步分化,从而产生抗体。经SRBC免疫后的小鼠可以产生溶血素,即抗SRBC抗体,这种抗体与补体一起作用可引起小鼠溶血反应,释放血红蛋白,故小鼠血液离心、稀释测定上清液可间接判断出血清中抗体含量[5]。

    本文研究结果显示,中剂量组和高剂量组抗体积数明显高于对照组,三个剂量组的抗体生成数明显高于对照组,均有显著性差异(P<0.05),说明大豆异黄酮可通过刺激B细胞分化增殖来提高抗体水平,从而增强大鼠体液免疫功能。

    参考文献

    [1] 钭晓珍,周 燕,吴卫英.大豆异黄酮对更年期综合征患者抑郁症状的影响[J].浙江中西医结合杂志,2013,23(12):1010-1012.

    [2] 王建华.大豆异黄酮研究进展[J]现代中药研究与实践,2013,27(1):85-88.

    [3] 郭 嘉.大豆异黄酮的营养探究[J].现代食品,2016(18):32-33.

    [4] 刘芝翠,王树军,曾维宏,等.T细胞活化促进B细胞产生抗体机制的研究[J].现代免疫学,2012,32(06):450-457.

    [5] 华 伟,李 凡,米新陵,等.刺山柑软膏对小鼠血清溶血素的影响[J].中国麻风皮肤病杂志,2011,27(1):26-27.

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更新时间:2024/12/22 22:53:08