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辽细辛提取物对桔小实蝇成虫的引诱作用及田间防治

范文

朱玲珑罗小凤李丽青余晓方思明高惠良李家波徐国良

摘要：为探索防治桔小实蝇的新途径，开展了辽细辛提取物对桔小实蝇成虫的引诱作用研究及田间防治试验。结果表明：辽细辛提取物对桔小实蝇成虫有强烈的引诱作用;辽细辛提取物能有效降低杨桃园桔小实蝇成虫种群数量，与对照区相比，防治区虫果率大大降低，防治效果达90%以上;用GC-MS方法测定辽细辛提取物的化学成分，其中左旋-β-蒎烯、左旋-α-蒎烯、杜仲酮、3，5-二甲氧基甲苯、黄樟脑、甲基丁香酚、3，4，5-三甲氧基甲苯、肉豆蔻醚等8种成分的相对含量较高，均大于2%。

关键词：桔小实蝇;辽细辛提取物;引诱;防治

中图分类号 S433.9文献标识码 A文章编号 1007-7731（2020）17-0105-04

Field Experiment on the Attractiveness to the Adults of Oriental Fruit Fly by Extract of Asarum heterotropoides F. Schmidt var. Mandshuricum （Maxim.） Kitag.

ZHU Linglong1 et al.

（1 School of Geography and Remote Sensing， Guangzhou University， Guangzhou 510006，China）

Abstracts： In order to explore a new way to control the oriental fruit fly，Bactrocera dorsalis， this paper studied the attractant effect of extract of Asarum heterotropoides F. Schmidt var. mandshuricum （Maxim.） Kitag （abbreviation EA） on adult Bactrocera dorsalis， and applied it to field control experiment. The results showed that EA had strong attraction effect on adult Bactrocera dorsalis and could effectively reduce the number of adult population of Bactrocera dorsalis in carambola orchard. Compared with the control area， the worm rate in the control area was greatly reduced， and the control effect was over 90%. On this basis， the chemical constituents of EA were determined by GC-MS. The relative contents of Bicyclo[3.1.1]heptane， 6，6-dimethyl-2-methylene-，（1S）-，（1S）-2，6，6-Trimethylbicyclo[3.1.1]hept-2-ene，2，4-Cycloheptadien-1-one，2，6，6-trimethyl-，3，5Dimethoxytoluene，Safrole，Methyleugenol，Benzene，1，2，3-trimethoxy-5-methyl-，1，3-Benzodioxole， 4-methoxy-6-（2-propenyl） were all higher than 2%， respectively.

Key words：Bactrocera dorsalis;Asarum heterotropoides F. Schmidt var. mandshuricum（Maxim.） Kitag extract; Attractiveefficacy; Management

桔小實蝇（Bactrocera dorsalis）是双翅目实蝇科的一种世界性害虫。该虫寄主范围广，能广泛寄生于250多种果树及农作物，主要通过成虫在果实上产卵，孵化后的幼虫在果实中为害鲜果肉，造成果实腐烂、落果，严重影响果实的品质和产量，给我国农业生产造成巨大损失。由于该虫较难防治，目前在华南、西南地区逐年急剧蔓延、猖撅，被称为水果的“头号杀手”。目前桔小实蝇的主要防治方法有套袋、诱杀和化学防治等。甲基丁香酚被证实对桔小实蝇雄成虫有强烈的引诱作用[1]，是应用最为广泛的桔小实蝇引诱剂，但其防治作用不大，因为甲基丁香酚主要作用于桔小实蝇的雄虫，对雌虫没有引诱作用。最早的引诱物是以其食物为基础，将天然的植物材料混合而成，对桔小实蝇两性成虫都可以产生诱集效应[2-6]。辽细辛（学名：Asarum heterotropoides F. Schmidt var. mandshuricum （Maxim.） Kitag。）是马兜铃科细辛属多年生草本植物;根状茎横走，根细长，叶片卵状心形或近肾形，先端急尖或钝，基部心形，顶端圆形，叶脉有毛，叶背毛较密;芽苞叶近圆形，花紫棕色，稀紫绿色;花期在顶部成直角弯曲，果期直立;花被裂片三角状卵形，花丝常较花药稍短，子房近球形，果半球状，5月开花[7]。辽细辛主要分布于中国黑龙江、吉林、辽宁，生于山坡、林下、山沟土质肥沃而阴湿地。辽细辛还是一种重要的中草药，关于其中医药学功效等方面的研究较多[8]，也发现有一定的杀虫（淡色库蚊）及杀菌作用[9，10]。前人研究发现辽细辛中的甲基丁香酚含量极高[11-13]，但其对桔小实蝇的引诱作用方面尚未见报道。

惠州地区气候条件适宜，寄主植物丰富，桔小實蝇可在不同寄主植物之间转移为害，造成其种群不断积累，在局部地区迅速增长。据博罗县调查资料显示，桔小实蝇在该地区每年发生10～12代，水果受害率普遍在50%以上，个别果园超过80%。本试验以辽细辛提取物为材料，以市场上应用较成熟的聪绿果实蝇饵剂[14-17]为对照，研究辽细辛提取物对桔小实蝇的引诱作用，为新型引诱剂的研发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料辽细辛购于东莞市海王星辰连锁药店，聪绿果实蝇饵剂由南京新安中绿生物科技有限公司研制;桔小实蝇性诱剂和诱捕器（漳州英格尔公司产品）。供试作物为杨桃，常规种植。防治对象为杨桃生产中常见的桔小实蝇的成虫。

1.2 仪器与设备蒸馏装置：蒸馏烧瓶1000mL、蛇形冷凝管、梨形分液漏斗、烧杯、1000mL控温电热套、试验室升降台、锥形烧瓶、滴管、铁架台、精油瓶、12V循环水泵、水槽。RE-52A旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂生产;GCMS-QP2010联用仪：日本岛津公司生产;0.5L和3.5L保鲜盒。

1.3 方法

1.3.1 引诱效果试验（1）田间引诱装置设置：3.5L保鲜盒，顶盖中间开孔（直径3cm），内壁涂机油，另用1个小的保鲜盒盛放对照品（3g左右）或辽细辛挥发油（3mL左右）置于大保鲜盒中间，盖好盖子，做好防雨措施，按预定时间检查粘住的虫口数量。（2）田间引诱试验：试验地点在广东省惠州市罗浮山六角坑果园。该果园面积约3hm2，连片种植，地势平坦开阔，杨桃果树为3年生，双排种植，株距2.2m，行距3m。试验时期从幼果发育期开始到果实成熟结束。该果园桔小实蝇发生量属中等发生水平。试验于2018年9—11月在杨桃园中连续进行，涂药时间分别是9月8日、10月16日、11月16日。根据该杨桃园的生境分为A、B、C区，每个区各设a、b试验点，在每点离地面约1m高处放置装好药剂（聪绿饵剂）或辽细辛提取物的保鲜盒，根据点距与放置时间进行4项试验，记录统计各保鲜盒诱集的桔小实蝇数量。

1.3.2 防治效果试验防治效果试验于2017—2018年在广东省惠州市罗浮山六角坑果园开展，选择果园内桔小实蝇发生中等的一片果树，划分防治区与对照区2个片区，两区相隔约100m。防治区内每点相距8m左右，每667m2放置10个诱虫保鲜盒，每隔25～30d换辽细辛提取液1次;对照区也相隔8m放1个保鲜盒，每667m2放置10个保鲜盒，但盒内空白。

（1）杨桃防治效果评价。采取5点取样法。2018年在防治区（放置辽细辛提取物）和对照区（空白）各标记5点，每点调查100个杨桃落地果，共调查3次，记录每点带虫果实数量，计算果实保护率，评价对杨桃果实的保护作用。调查时间分别是2018年9月15日、10月13日、11月17日。

虫果率（%）=被害果数/调查果总数×100

防治效果（%）=（对照区虫果率-涂药区虫果率）/对照区虫果率×100

（2）杨桃落果虫口数及变化趋势。2018年分别在防治区和对照区果园中心各悬挂5个桔小实蝇性诱剂诱捕器，每个诱捕器相距100m，悬挂高度为离地1.5m。在防治区每个诱捕器中加1mL辽细辛提取物，每30d添加1次，每7d调查诱捕器中的虫数并清空;对照区的5个诱捕器里面不放置任何东西，作为空白对照，在检查统计防治区虫口数时也统计对照区虫口数量。

1.3.3 精油成分分析（1）提取精油方法。辽细辛药材（筛选去泥沙）剪碎取250g装进蒸馏烧瓶，加水浸泡1h，加热烧开蒸馏5h得蒸馏溶液，用分液漏斗分离沉淀精油部分，装精油瓶。每500g细辛原药可得精油3mL左右，每6mL精油可作一份试验样本。试验时可用PP盒盛装，但不可以用PC盒装，会腐蚀PC盒。

（2）GC-MS分析。GC-MS分析使用气相色谱-质谱联用仪，型号Agilent7890B-5977A。色谱条件：色谱柱：安捷伦19091s-433HP-5MS，5%苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×250μm×0.25μm）;进样口温度为260℃;程序升温：起始温度70℃，维持0min，之后以1℃/min升至75℃，维持5min;然后以8℃/min升至107℃，维持0min;继续以50℃/min升至125℃，维持5min;再以10℃/min升至160℃，维持3min;最后以8℃/min升至240℃，维持4min。载气：He，流速30mL/min，分流比20∶1，进样量1μL，Gassaver：关闭。质谱条件：接口温度：260℃，电离方式：EI，电子能量：70eV，离子源温度：230℃，四级杆温度：150℃，调谐方式：标准调谐，质量扫描方式：全部扫描范围：50～550amu，电子倍增器电压：1553V，溶剂延迟：4min，进样量：1μL，每个样品进样2针。

（3）化合物的初步鉴定。定性分析采用计算机谱库（美国 NIST 2005）进行初步检索及匹配分析，并结合文献进行人工谱图解析，确定挥发性化合物的各化学成分。采用面积归一法计算已确定的辽细辛挥发性化合物的相对含量。

1.4 数据分析采用SPSS22.0软件对试验数据进行分析。

2 结果与分析

2.1 辽细辛提取物对桔小实蝇成虫的引诱效果将辽细辛提取物与聪绿饵剂分别装在保鲜盒里，分别放置在a、b试验点5d，间距约5m，然后记录统计各保鲜盒里诱集到的桔小实蝇数量（结果见表1）。

将辽细辛提取物与聪绿饵剂分别装在保鲜盒里，分别放置在a、b试验点5d，间距约5m，5d后调换位置再放5d，然后记录统计各保鲜盒里诱集到的桔小实蝇数量，结果见表2。

将辽细辛提取物与聪绿饵剂分别装在保鲜盒里，分别放置在a、b试验点5d，间距约10m，5d后调换位置再放5d，然后记录统计各保鲜盒里诱集到的桔小实蝇数量，结果见表3。

将辽细辛提取物与聪绿饵剂分别装在保鲜盒里，分别放置在a、b试验点5d，间距约20m，5d后调换位置再放5d，然后记录统计各保鲜盒里诱集到的桔小实蝇数量，结果见表4。

2.2 GC-MS分析结果提取的辽细辛精油经GC-MS色谱分析，各成分含量详见表5。其中左旋-β-蒎烯、左旋-α-蒎烯、杜仲酮、3，5-二甲氧基甲苯、黄樟脑、甲基丁香酚、3，4，5-三甲氧基甲苯、肉豆蔻醚等8种成分的相对含量较高，均大于2%;含量最高的是甲基丁香酚，相对含量高达24.88%，其次是3，5-二甲氧基甲苯，含量为12.69%。

2.3 辽细辛提取物的防治效果

2.3.1 杨桃园防治效果由表6可知，用辽细辛提取物防治桔小实蝇的效果明显，与对照区相比，防治区虫果率大大降低，防治效果分别达到90.13%、90.35%、91.43%。

2.3.2 桔小实蝇诱虫量及变化趋势由图1可以看出，防治区的桔小实蝇虫口数始终处于较低水平，显著低于对照区。

3 结论与讨论

试验结果表明：辽细辛提取物对桔小实蝇成虫有强烈的引诱作用，不仅能引诱雄成虫，而且还能吸引雌成虫，能显著降低桔小实蝇种群数量;其主要成分有左旋-β-蒎烯、左旋-α-蒎烯、杜仲酮、3，5-二甲氧基甲苯、黄樟脑、甲基丁香酚、3，4，5-三甲氧基甲苯、肉豆蔻醚等50种;与对照比较，辽细辛提取物能显著降低杨桃园桔小实蝇种群数量，杨桃虫果率大大降低，防治效果达90%以上。

目前，市场上应用较广泛的桔小实蝇引诱剂是聪绿桔小实蝇饵剂，与之相比，辽细辛提取物防治效果毫不逊色，但本次研究的提取方法出精油率不高（约1%），成本过高，要实现商业化生产，还必须进一步提高工艺水平，降低成本。

据报道，寄主植物马拉巴粟叶片气味对桔小实蝇有显著的产卵引诱效果[5]。山茱萸果实产生的挥发物对苹果实蝇成虫有较强的引诱效果。经鉴定，果实挥发物中起引诱作用的主要成分为乙酸乙酯、3-甲基-1-1丁醇、乙酸异戊酯、辛醇和石竹烯[6]。而本次研究中具体是哪种主要成分起引诱作用或哪幾种混合成分共同发挥作用还无法确定，有待进一步研究探讨。

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（责编：徐世红）

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