《霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用》-农学论文，农业论文-论文范文参考-科学狗论文网

标题

霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用

范文

谷仿丽黄仁术何晓梅

摘要?[目的]探究霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用。[方法]应用葡聚糖硫酸钠建立溃疡性结肠炎模型，灌胃给予模型小鼠不同剂量的霍山石斛多糖，观察霍山石斛多糖对模型小鼠DAI、血清细胞因子IL-1、TNF-α水平及结肠病理组织学的影响，分析霍山石斛对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用。[结果]与模型组相比，霍山石斛多糖高、中剂量组显著降低DAI、血清细胞因子IL-1、 TNF-α水平（?P?<0.05），改善结肠病理组织学。[结论]霍山石斛多糖通过抗炎治疗溃疡性结肠炎小鼠。

關键词?霍山石斛多糖;溃疡性结肠炎;小鼠;抗炎

中图分类号?R285?文献标识码?A

文章编号?0517-6611（2020）14-0176-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.14.049

Abstract?[Objective]To study the anti-inflammatory effect of?Dendrobium huoshanense?polysaccharide on ulcerative colitis mice.[Method]The ulcerative colitis model was established by dextran sodium sulfate，and different doses of?Dendrobium huoshanense?polysaccharide were given to the model mice by gavage.The effects of?Dendrobium huoshanense?polysaccharide on Dai，IL-1，TNF-α levels in serum and histopathology of colon were observed，and the anti-inflammatory effects of?Dendrobium huoshanense?on ulcerative colitis mice were analyzed.[Result]Compared with the model group，the levels of Dai，IL-1 and TNF-α in the high and medium dose group were significantly reduced （?P?<0.05），and the histopathology of colon was improved.[Conclusion]Dendrobium huoshanense?polysaccharide has anti-inflammatory effect on ulcerative colitis mice.

Key words?Dendrobium huoshanense?polysaccharide;Ulcerative colitis;Mice;Anti-inflammatory

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）发病机制尚不清楚，多认为是肠道感染、自身免疫、遗传、精神心理等相互作用的结果[1]。溃疡性结肠炎发病时炎症因子水平升高，导致结肠黏膜损伤，甚至糜烂[2];患者表现为腹泻、腹痛、黏液脓便血、体重减轻等。目前主要通过抗炎促进结肠组织恢复、增加肠道黏膜免疫力治疗溃疡性结肠炎[3]。

霍山石斛被誉为“中华九大仙草之首”，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、明目强身等功效[4]。现代研究表明，霍山石斛主要含有多糖类物质、石斛碱、多种游离氨基酸及丰富的微量元素等成分[5]，具有抗炎、增强免疫、调节胃肠道、降血糖、肝保护等作用[6-7]。因此，笔者研究霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用。

1?材料与方法

1.1?材料

1.1.1?实验动物。昆明种健康小鼠，体重（22+2）g，购自安徽医科大学动物研究所动物实验中心。

1.1.2?仪器设备。

电子分析天平（郑州万博仪器设备有限公司）;旋转蒸发仪（R52A，上海亚荣）;Synergy H1 多功能酶标仪（美国佰腾仪器有限公司）。

1.1.3?药品和试剂。霍山石斛采自皖西学院石斛种植园;葡聚糖硫酸钠由美国sigma公司生产;柳氮磺砒啶肠溶片由上海信宜天平制药有限公司生产;粪便隐血定性检测试剂盒（邻联甲苯胺法）由北京雷根生物技术有限公司生产;IL-1、 TNF-α检测试剂盒由南京建成生物工程研究所生产;乙醇、硫酸、蒽酮等均为分析纯。

1.2?方法

1.2.1?霍山石斛多糖的制备。

取新鲜的大别山产霍山石斛，除去杂质，清水洗净，50 ℃烘干，粉碎过40目筛，药粉继续烘干至恒重。以料液比1∶30，80 ℃水提3次，每次2 h。合并提取液，减压浓缩至相对密度1.12。浓缩液中加入95%乙醇，边加边搅拌，加至浓缩液的2倍，保鲜膜密封，放置于4?℃冰箱24 h，3 000 r/min离心10 min，取沉淀物去蛋白，纤维柱法分离得霍山石斛多糖，采用蒽酮-硫酸法[8]测定多糖含量。

1.2.2?溃疡性结肠炎模型复制。

取体重相近的健康小鼠60只，雌雄性各半，随机分为空白组（10只）和模型组（50只）。正常组小鼠正常摄食、饮水，模型组小鼠自由饮用配制的5%葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DDS）水溶液5 d，建成溃疡性结肠炎模型[9]。

1.2.3?动物分组与给药。

将溃疡性结肠炎模型小鼠随机分为霍山石斛多糖高剂量（200 mg/kg）、中剂量（100 mg/kg）、低剂量（50 mg/kg）组，柳氮磺砒啶（sulfasalazine，SASP）组，模型组。于试验第6天，分别灌胃给予霍山石斛多糖高、中、低剂量组霍山石斛多糖200、100、50 mg/kg，SASP组300 mg/kg，正常组蒸馏水，一天1次，连续灌胃14 d。

1.2.4?指标采集与检测。

试验期间，分别在造模第5天、给药7 d、14 d末，检测试验小鼠体重、大便性状及便血，并根据表1评分計算DAI=（体质量下降百分率+大便性状+便血）/3[10]。给药第14天各小组实验鼠末次给药1 h后，摘眼球取血后即刻颈椎脱臼处死小鼠，解剖，取距肛门8 cm处部分结肠，用生理盐水冲洗，除去多余脂肪及附着粪便，观察结肠黏膜病变情况，随后浸泡在10%甲醛溶液中固定，乙醇脱水，石蜡包埋、切片，苏木精-伊红染色，显微镜下观察每个结肠组织状况。血液离心后取血清，ELISA法检测白介素-1（Interleukin-1beta，IL-1）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alph，TNF-α）水平。

1.3?数据统计与分析?所有数据采用SPSS 23进行统计分析，组间比较?采用t检验，P?<0.05为有统计学意义。

2?结果与分析

2.1?霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠DAI的影响

模型组小鼠自由饮用葡聚糖硫酸钠水溶液5 d后，出现了明显的溃疡性结肠炎症状，黏液脓血便、身体时而蜷曲状、体重下降、精神不佳;持续灌胃给药14 d 后，各给药组与模型组比较，症状明显改善，体重增长，大便性状趋于正常。从图1可看出，小鼠造模5 d，DAI评分显著升高（?P?<0.01）;给药7 d，霍山石斛多糖高、中剂量组DAI显著降低（?P?<0.05），低剂量组有降低趋势，但不明显（?P?>0.05）;给药14 d，霍山石斛高、中、低剂量组均显著降低DAI评分，与SASP组相当;表明霍山石斛多糖具有改善溃疡性结肠炎小鼠一般症状的作用。

2.2?霍山石斛多糖对溃疡性结肠炎小鼠细胞因子IL-1、TNF-α水平的影响

从表2可以看出，与正常组比较，模型组血清IL-1、TNF-α水平显著升高（?P

2.3?结肠黏膜大体观察及组织病理学观察

从图2可以看出，正常组结肠黏膜完整，肉眼观察未见水肿及溃疡。模型组结肠黏膜损伤最严重，溃疡数目多且范围广，组织水肿明显，有炎症细胞浸润，部分腺体被毁坏。各治疗组与模型组相比结肠黏膜光滑平整，能看到愈合的溃疡组织，无炎症细胞浸润，无明显溃疡及水肿，其中SASP组和霍山石斛高剂量组与正常组最为接近。

3?小结

有研究表明，遗传、环境、精神等因素会激发机体的免疫系统，促使免疫细胞释放IL-1、TNF-α等炎性细胞因子，损伤肠黏膜，引起结肠黏膜渗漏、水肿，甚至溃疡，引发黏液脓血便、体重减轻等[11]。该研究结果发现，霍山石斛多糖可显著降低炎性细胞因子IL-1、TNF-α水平，减轻结肠黏膜损伤，促进溃疡愈合，降低了DAI评分，表明霍山石斛多糖具有通过抗炎治疗溃疡性结肠炎作用。

参考文献

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[11]张瑞芳，陈朝晖，刘漪沦，等.溃疡性结肠炎的发病机制及其治疗进展[J].生命的化学，2018，38（2）：241-249.

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