人参中总皂苷含量测定的研究
陈薇薇
药材与试剂
5年生园参，样品经50℃烘干粉碎后（过40目筛），密封保存备用。
甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿；以上试剂均为国产分析纯，实验用水均为蒸馏水。
人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。
仪器与设备
TU-1810 型紫外分光光度计（北京普析通用仪器）。
方法
对照品溶液的制备。取人参皂苷 Re 对照品 20mg，精密称定，加甲醇溶解，定容至 10ml，摇匀、滤过，即得。
供试品溶液的制备。取供试品粉末约 1.0g（细粉），精密称定，用中性滤纸包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，弃去乙醚液，供试品药包挥干溶剂，加入甲醇浸泡过夜，次日再加入适量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次数5～6次/h，回流3次，每次2h，以人参皂苷提尽为准（ 定性鉴别为阴性），合并甲醇提取液，回收溶剂，少量甲醇提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。 蒸馏水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水饱和正丁醇50ml进行萃取，共4次。取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀、滤过即得。
人参总皂苷提取定性鉴别。供试品回流提取3次以后，取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液，用10%硫酸乙醇显色，将薄层板置通风橱内，喷10% 硫酸乙醇溶液，105℃ 加热。
标准曲线的绘制。精密吸取人参皂苷Re对照品 10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中，水浴挥干甲醇。分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml，72%硫酸试液 5ml，充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min，立即用冰水冷却10min，摇匀。以试剂做空白，照分光光度法于544nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。
稳定性考察 。精密吸取样品溶液20μl，按3.4项下方法显色，并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
精密度 。（1）重复性。精密吸取同一供试品溶液20μl，按方法显色，连续测定5次，计算样品中的总皂苷含量。
（2）重现性。精密吸取同一供试品溶液20μl，连续测定5次，按方法显色，计算样品中的总皂苷含量。
回收率。精确吸取供试品溶液20μL，平行5份，分别置于具塞试管中，分别精密加入Re对照品溶液（2mg/mL）20μL、30μL、40μL、50μL、60μL，计算回收率。
样品含量测定。取样品粉末约1.0g，精密称定，平行称定3份，制备供试品溶液，测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
试验结果与分析
人参总皂苷提取定性鉴别 。无紫红色斑点（总皂苷阳性应为紫红色斑点）。结果表明，样品中人参总皂苷已提取完全。
线性范围。总皂苷测定的标准曲线为 y=0.0110x-0.0145，测定方法在20至120μg范围内线性关系较好，相关系数 r2=0.9998。
稳定性。
由上表可知，样品显色后在30min内的相对标准偏差為2.35%，在 30min 内样品的稳定性较好，溶液显色后应在30min内测定。
精密度。实验结果见表2和表3。
由上表可知，重复性实验的标准偏差为0.41%，重现性实验的相对标准偏差为1.45%，说明本试验的精密度较好。
回收率。
由上表可知，5个回收率试验结果的平均值为100.6%，相对标准偏差为1.65%，说明此方法可用于人参皂苷含量的测定。
含量测定。
讨论
本实验采用索氏热回流方法提取人参中人参总皂苷，通过薄层色谱定性鉴别，确定可将人参中的总皂苷提取完全。运用紫外-可见分光光度法测定人参中人参总皂苷含量，方法简便易行，精确度高，稳定性和重现性均较好，适用于人参中总皂苷的含量测定。
药材与试剂
5年生园参，样品经50℃烘干粉碎后（过40目筛），密封保存备用。
甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿；以上试剂均为国产分析纯，实验用水均为蒸馏水。
人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。
仪器与设备
TU-1810 型紫外分光光度计（北京普析通用仪器）。
方法
对照品溶液的制备。取人参皂苷 Re 对照品 20mg，精密称定，加甲醇溶解，定容至 10ml，摇匀、滤过，即得。
供试品溶液的制备。取供试品粉末约 1.0g（细粉），精密称定，用中性滤纸包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，弃去乙醚液，供试品药包挥干溶剂，加入甲醇浸泡过夜，次日再加入适量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次数5～6次/h，回流3次，每次2h，以人参皂苷提尽为准（ 定性鉴别为阴性），合并甲醇提取液，回收溶剂，少量甲醇提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。 蒸馏水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水饱和正丁醇50ml进行萃取，共4次。取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀、滤过即得。
人参总皂苷提取定性鉴别。供试品回流提取3次以后，取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液，用10%硫酸乙醇显色，将薄层板置通风橱内，喷10% 硫酸乙醇溶液，105℃ 加热。
标准曲线的绘制。精密吸取人参皂苷Re对照品 10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中，水浴挥干甲醇。分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml，72%硫酸试液 5ml，充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min，立即用冰水冷却10min，摇匀。以试剂做空白，照分光光度法于544nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。
稳定性考察 。精密吸取样品溶液20μl，按3.4项下方法显色，并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
精密度 。（1）重复性。精密吸取同一供试品溶液20μl，按方法显色，连续测定5次，计算样品中的总皂苷含量。
（2）重现性。精密吸取同一供试品溶液20μl，连续测定5次，按方法显色，计算样品中的总皂苷含量。
回收率。精确吸取供试品溶液20μL，平行5份，分别置于具塞试管中，分别精密加入Re对照品溶液（2mg/mL）20μL、30μL、40μL、50μL、60μL，计算回收率。
样品含量测定。取样品粉末约1.0g，精密称定，平行称定3份，制备供试品溶液，测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
试验结果与分析
人参总皂苷提取定性鉴别 。无紫红色斑点（总皂苷阳性应为紫红色斑点）。结果表明，样品中人参总皂苷已提取完全。
线性范围。总皂苷测定的标准曲线为 y=0.0110x-0.0145，测定方法在20至120μg范围内线性关系较好，相关系数 r2=0.9998。
稳定性。
由上表可知，样品显色后在30min内的相对标准偏差為2.35%，在 30min 内样品的稳定性较好，溶液显色后应在30min内测定。
精密度。实验结果见表2和表3。
由上表可知，重复性实验的标准偏差为0.41%，重现性实验的相对标准偏差为1.45%，说明本试验的精密度较好。
回收率。
由上表可知，5个回收率试验结果的平均值为100.6%，相对标准偏差为1.65%，说明此方法可用于人参皂苷含量的测定。
含量测定。
讨论
本实验采用索氏热回流方法提取人参中人参总皂苷，通过薄层色谱定性鉴别，确定可将人参中的总皂苷提取完全。运用紫外-可见分光光度法测定人参中人参总皂苷含量，方法简便易行，精确度高，稳定性和重现性均较好，适用于人参中总皂苷的含量测定。
