海南桥头地瓜影响小鼠免疫功能的初步研究

    郑通 王锐敏 王国旭 王蔓儿 王英

    

    

    摘 要：研究海南桥头地瓜对小鼠免疫功能的影响，讨论其在免疫功能方面的应用价值。通过用海南桥头地瓜连续喂养小鼠30天后，观察小鼠的生长情况，计算脏体指数，检测其诱发迟发型变态反应（delayed type hypersensitivity，DTH）和对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。相比对照组，实验组小鼠DTH反应程度增强，巨噬细胞的吞噬功能增强。产自海南澄迈桥头镇的桥头地瓜初步证实具有影响小鼠免疫功能的作用，其相关机制值得进一步研究探讨。

    关键词：地瓜;免疫功能;小鼠

    甘薯，俗称红薯、番薯、甜薯、地瓜等，是我国重要粮食、饲料和食品工业原料作物。我国甘薯种植面积约占世界总面积的70%，年产量占世界总产量的80%[1]，资源丰富。近年来随着人们健康意识增强，甘薯的营养保健功效也日益引起人们关注。海南桥头地瓜是甘薯品种之一，产于海南省澄迈县桥头镇，甜度适中，常吃不腻，深受人们的喜爱。本文对海南桥头地瓜影响小鼠免疫功能效果进行了研究，这对于明确甘薯保健效果有重要意义。现将结果汇报如下。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    海南桥头地瓜产自海南省澄迈县桥头镇;生理盐水购自四川科伦药业股份有限公司（产品批号L218081805）;绵羊红细胞悬液购自北京博尔西科技有限公司;瑞氏-吉姆萨染液购自北京雷根生物技术有限公司;可溶性淀粉购自西陇化工股份有限公司;鸡红细胞悬液由课题组新鲜配制。

    1.2 实验动物

    健康昆明小鼠30只，雄性，8～10周龄，体重（36.13±652）g，购自长沙市天勤生物技术有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 桥头地瓜粉的制备

    桥头地瓜洗干净切片、烘干，用粉碎机研磨成粉末，装入干净瓶子，室温干燥保存，备用。

    1.3.2 桥头地瓜对小鼠生长情况的影响

    将小鼠随机分为2组，每组15只。分组后测量初始体重，对照组喂食普通饲料加生理盐水，实验组喂食等量普通饲料加溶解桥头地瓜粉（剂量250g/Kg）的生理盐水，饲养时间30天。小鼠实验饲养期间测量体温、观察进食、活动及精神状态等方面的表现。

    1.3.3 桥头地瓜对小鼠脏体指数的影响

    第30天给药后，每组取4只禁食不禁水12h后分别称体重，处死后剥离肝脏、脾脏称重量，并计算肝体指数（肝脏重量与体重比值）和脾体指数（脾脏重量与体重）。

    1.3.4 诱发迟发型变态反应（DTH）（采用足跖增厚法）

    第30天给药30min后，每组分别取4只小鼠进行腹腔注射2%绵羊红细胞悬液0.2mL，4天后测量左后足趾厚度，测量后在测量部位注射20%绵羊红细胞悬液20μL，注射24h后测量左后足趾部厚度，同一部位测量三次，取平均值。

    1.3.5 桥头地瓜对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

    两组小鼠各取4只，分别于腹腔注射6%可溶性淀粉肉汤1mL，3天后，再分别于腹腔注射1%新鲜鸡红细胞悬液05mL，并轻轻揉腹。30min后处死小鼠，取腹腔液涂片，干燥后进行瑞氏-吉姆萨染液染色，置显微镜下观察并按以下公式计算吞噬指数。实验重复3次。

    1.3.6 数据处理

    实验数据用SPSS18.0统计软件处理，计量资料用x-±s表示，采用t检验，p<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 桥头地瓜对小鼠生长情况的影响

    实验饲养期间小鼠体温正常，进食、进水量正常，毛皮光泽度好，活动自如、反应敏捷，精神状态良好，实验组和对照组小鼠喂食30天前后体重的变化无统计学意义（t实=0.044，p=0.968;t对=0.629，p=0.574），见表1。

    2.2 桥头地瓜对小鼠免疫功能的影响

    实验组小鼠的肝体指数、脾体指数与对照组比较，差异无统计学意义（t肝=0.016，p=0.988;t脾=0.784，p=0.490），说明桥头地瓜对小鼠的脾脏/体重比值、肝脏/体重比值均无影响。实验组小鼠足跖肿胀度较对照组明显，两者间的差异具有显著性（t=3.903，p=0.030）;镜下可观察到实验组小鼠巨噬细胞吞噬的鸡红细胞相比对照组多，计算吞噬指数经统计学分析显示，两组的差异具有统计学意义（t=15.000，p=0.001）。见表2。

    3 讨论

    甘薯是重要的粮食作物，仅次于水稻、小麦、玉米。含有淀粉、膳食纤维、胡萝卜素、维生素A、维生素C和钾、铁、铜、硒、钙等10余种微量元素，具有防癌、去脂降压、降血糖、保护血管、通便润肠、延缓衰老等作用，营养价值高，被营养学家称为营养最均衡的天然保健食品[2-6]。甘薯能“煮食补脾胃，益气力，御风寒，益颜色”。在日本国家癌症研究中心公布的20种抗癌蔬菜排行中甘薯名列榜首[7-9]。

    本次研究結果显示，实验组小鼠喂食桥头地瓜后体重和喂食桥头地瓜前体重相比较，差异无统计学意义（p>0.05），说明桥头地瓜对小鼠体重的影响无统计学意义。实验组小鼠的脾体指数、肝体指数和对照组的脾体指数、肝体指数比较，差异也无统计学意义（均p>0.05）。DTH诱导试验结果显示实验组小鼠足跖肿胀度显著于对照组（p<0.05）;经喂食桥头地瓜后的小鼠巨噬细胞的吞噬功能与对照组相比，显著增强，具有统计学意义（p<0.01）。这些结果显示桥头地瓜对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞都可产生明显的增强效应，初步提示桥头地瓜具有增强免疫细胞功能作用。此次实验研究选用的桥头地瓜产自海南省澄迈县桥头镇。桥头镇土壤富含硒元素，因此，桥头地瓜也被喻为富硒地瓜。

    硒与动物的生长发育、繁殖和疾病的发生有着密切关系，1973年世界卫生组织将其定为人和动物的必需微量元素之一[10]。众多研究显示，硒参与机体的抗氧化活性、甲状腺激素代谢、修复细胞、抗癌防癌等生理功能[11-12]。硒还能促进淋巴细胞增殖、分化和促进抗体的生成、细胞因子的分泌等[13-14]。本次实验结果中桥头地瓜增强淋巴细胞和巨噬细胞的作用是否和其富含硒元素有关值得进一步探讨。

    （感谢在本次实验中王一彬、王帅两位同学给予帮助。）

    参考文献：

    [1]田光兰，张晓琦，刘存芳.红薯的活性成分及开发利用前景[J].江苏调味副食品，2015（02）：5-7.

    [2]吴广辉，毕韬韬.红薯营养价值及综合开发利用研究进展[J].食品研究与开发，2015，36（20）：189-192.

    [3]郑健.红薯的营养价值与保健功能[J].科技视界，2018（05）：170+158.

    [4]田圣陶.番薯的营养价值与种植技术[J].乡村科技，2019（35）：100+103.

    [5]Mohanraj R，Sivasankar S.Sweet Potato（Ipomoea batatas[L.]Lam）-A Valuable Medicinal Food：A Review[J].Journal of Medicinal Food，2014，17（7）.

    [6]商丽丽，赵德虎，杜清福，林祖军，辛国胜，韩俊杰.甘薯的营养成分及开发利用研究进展综述[J].安徽农学通报（上半月刊），2012，18（09）：73-74.

    [7]张嘉欣，张嘉琪，李育军，黎仲恒，陈景益，植石灿.甘薯营养与加工研究进展[J].长江蔬菜，2019（02）：31-34.

    [8]徐夢瑶，赵祥颖，张立鹤，贾洪玉，陈清春，刘建龙.甘薯的营养价值及保健作用[J].中国果菜，2017，37（05）：17-21+47.

    [9]赵秀玲.甘薯的营养成分与保健作用[J].中国食物与营养，2008（10）：58-60.

    [10]杨晋青.不同来源的硒及其含量对断奶仔猪免疫系统的影响[J].中国畜牧兽医文摘，2017，33（04）：225+199.

    [11]李冰心，曹楠，刘洋，李婉雁，田允波，许丹宁.硒对畜禽免疫功能的影响[J].仲恺农业工程学院学报，2018，31（02）：65-71.

    [12]Nido，S.A.，Shituleni，S.A.，Mengistu，B.M.et al.Effects of Selenium-Enriched Probiotics on Lipid Metabolism，Antioxidative Status，Histopathological Lesions，and Related Gene Expression in Mice Fed a High-Fat Diet.Biol Trace Elem Res 171，399-409（2016）.https：//doi.org/10.1007/s12011-015-0552-8.

    [13]贾大庆，王晓雅，韩杨，王建发，武瑞.硒与奶牛免疫能力的相关性研究[J].畜牧与饲料科学，2019，40（04）：12-14.

    [14]张运国，赵子刚，王万平，罗登荞.硒的生物学功能及对动物的作用[J].贵州畜牧兽医，2016，40（03）：25-27.