光谱法检测大脑神经递质多巴胺

    张庆云 蔡美娜 程铭 张丽 赵朋 董浩垚

    摘要：多巴胺是人脑中一种重要的神经递质，帕金森病等神经系统病变与其含量异常有密切的关系。目前常用的多巴胺检测方法有光谱法、高效液相色谱法、化学修饰电极法、传感器法、毛细管电泳法，本文就光谱法做一综述。

    关键词：荧光法；化学发光法；检测

    中图分类号：O65 文献标识码：A 文章编号：1006-3315（2015）07-158-001

    多巴胺（dopamine， DA）是一类儿茶酚胺类物质（CAs），它存在于神经组织及体液中，是下丘脑和脑垂体腺中的一种重要的神经递质，脑垂体内分泌功能的协调与多巴胺在脑内特定区域的分布及含量有密切关系，导致神经功能紊乱，是帕金森病（Parkinsons disease）发病的一个重要影响因素。另外，多巴胺还能够引起心脏兴奋，使血流量增加，以用于感染性休克和心源性休克。所以，进行多巴胺检测的研究具有重要的现实意义[1]。本文就多巴胺的光谱法检测作一综述。

    利用光谱法测定多巴胺是通过测定DA在被测定波长处的光吸收度来定量测定DA，包括荧光法和化学发光法等，这些方法简便、快速、有效，是DA检测中最常用的方法。

    1.荧光法

    汤涛等[2]报道利用铁氰化钾氧化DA生成多巴胺三羟吲哚，再利用锌离子提高其荧光强度定量测定荧光，从而来测定DA。这种方法不需要对DA进行分离纯化即可达到目的，操作简便易行，分析速度快，但灵敏度仍难以满足临床检验的需要。研究发现，在碱性条件下，邻苯二甲醛和B-巯基乙醇（OPAME）可与DA发生化学反应生成一种异吲哚类荧光物质，经400nm光波激发，产生462nm荧光，荧光强度与DA的浓度在一定范围内呈良好的线性关系。此种方法被称为荧光分光光度法，优点是线性范围宽，灵敏度较高，分析速度快，操作简便，无需昂贵的试剂和仪器。目前，已成功应用于盐酸多巴胺在药物制剂中含量的测定。

    2.流动化学注射发光法

    Nozaki等[3]报道先将硫酸根衍生物固定在微珠上，然后整体加到1ml的DA溶液中，室温下振荡10min，取出微珠用蒸馏水冲洗后，将其放入1ml咪唑溶液（0.1mol/L，PH=9）中，使DA的两个酚羟基在碱性环境中与咪唑反应生成过氧化氢，最后取出50μL反应液用辣根过氧化物酶催化鲁米诺流动注射化学发光法（FI-CL）分析，获得了较好的检测结果。该方法灵敏度较高，并且部分克服了目前用化学发光法检测DA之前先分离的不足，可以简化操作，减少资金设备的投资，但检测灵敏度不能满足临床检验的需要。

    参考文献：

    [1]张庆云，李佳林，郑培，李艳霞，车雨轩，董晓东.大脑神经递质多巴胺的检测方法 [J]医学研究与教育，2014，31（1）：87-90.

    [2]汤涛等. 安徽医学[J]1990 ，11 （5） ：9 - 11.

    [3]Nozaki O ，et al .Luminescence ，1999 ，14 （6） ：369 - 374.