伊红荷移光度法测定盐酸地尔硫卓的含量

    王晓玲 张萍

    

    

    

    摘 ?????要：实验研究了在pH=3.6的邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲液中，盐酸地尔硫卓与伊红可形成稳定的电荷转移络合物，据此建立了盐酸地尔硫卓荷移光度分析的新方法。络合物最大吸收波长为550 nm，表观摩尔吸光系数为4.61×104 L·mol-1·cm-1，其线性方程为Y = 0.488 3X+0.024 5， 相关系数，R=0.999 8，盐酸地尔硫卓的量在1.5～7.5 mg·L-1质量浓度范围内符合朗伯比尔定律，该法选择性和重现性好，灵敏度较高，可用于快速检测药品中盐酸地尔硫卓的含量。

    關 ?键 ?词：盐酸地尔硫卓;伊红;荷移光度法

    中图分类号：O 657.32 ??????文献标识码：A ???文章编号： 1671-0460（2019）01-0218-03

    Abstract：A novel spectrophotometric method for the determination of diltiazem hydrochloride was established based on the charge transfer reaction between diltiazem hydrochloride and eosin Y in pH=3.6 potassium hydyogen phthalate-HCl. The results showed that the apparent molar absorptivity of the color complex was 4.61×104 L·mol-1·cm-1 at 550 nm. The linear regression equation was Y=0.488 3X+0.024 5， the correlation coefficient was 0.999 8， the adsorption conformed to Lambert-Beer law in the range of 1.5～7.5 mg·L-1.The method is simple， rapid， high sensitive and suitable for determination of diltiazem hydrochioride content in medicine.

    Key words： Diltiazem hydrochloride; Eosin Y; Charge-transfer spectrophotometric method

    盐酸地尔硫卓是一类典型高选择性的苯并硫氮卓类钙拮抗剂（又名合心爽），具有优良的药效学特点和广泛的临床适应性，主要用于治疗冠心病、高血压、心律失常、劳力型心绞痛等。目前，盐酸地尔硫卓的分析方法相对较少，主要有流动注射-化学发光法[1]、高效液相色谱法[2，3]、反相高效液相色谱法[4，5]、荷移分光光度法[6]等。伊红和盐酸地尔硫卓的荷移反应研究鲜见报道。研究发现伊红分子中由于溴取代基的强诱导效应，使得苯环平面成为缺电子体系，可以作为电子接受体，盐酸地尔硫卓分子中叔氨基上的氮原子含有孤对电子可以作为电子给予体，在此理论基础上，发现二者的荷移反应介质不同于文献中报道的基本上都是有机溶剂，而是可在邻苯二甲酸氢钾-HCl （pH=3.6）缓冲介质中发生电荷转移反应，形成新的络合物分子，此荷移反应的灵敏度相对较高，据此建立了荷移光度法测定盐酸地尔硫卓的分析方法，测定了盐酸地尔硫和伊红的络合比为1∶1，初步探讨了盐酸地尔硫和伊红的反应机理，方法用于测定药品中盐酸地尔硫卓的含量，结果满意。

    1 ?实验部分

    1.1 ?主要仪器与试剂

    邻苯二甲酸氢钾-HCl （pH=3.6）缓冲溶液。1.2 ?实验方法用两只刻度相同的25 mL具塞比色管，分别加入伊红溶液1.5 mL，pH=3.6的邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲溶液1.0 mL， 向其中一支加入一定量的盐酸地尔硫卓溶液，另一支不加，用去离子水稀释至10 mL，摇匀，放置在40 ℃水浴中加热15 min，取出后用自来水迅速冷却15 min。以试剂空白为参比，用1 cm比色皿在分光光度计上，在550 nm处测定吸光度值A。

    2 ?结果与讨论

    2.1 ?吸收曲线

    按照实验方法，测定不同波长下的吸光度A0和吸光度A，作出吸收光谱图。如图1所示，盐酸地尔硫卓在可见光区没有吸收，伊红的最大吸收波长为518 nm盐酸地尔硫卓能与伊红反应生成电荷转移络合物的最大吸收波长550 nm，荷移络合物的最大吸收波长比试剂空白的最大吸收波长红移了32 nm。实验选择测定550 nm为测定波长。

    1： 伊红+邻苯二甲酸氢钾（pH=3.6）

    2： 伊红+邻苯二甲酸氢钾（pH=3.6）+盐酸地尔硫卓

    2.2 ?反应条件的选择

    2.2.1 ?最佳介质条件

    按照实验方法，试验了KCl-HCl（pH=1.7）、邻苯二甲酸氢钾-HCl（pH=3.6）、NaAc-HAc（pH=4.2）、邻苯二甲酸盐（pH=5.6）、Na2HPO4-NaH2PO4（pH=6.2）、NH3·H2O-NH4Cl（pH=8.0）、硼砂-NaOH（pH=9.8）、NaHCO3-NaOH（pH=11.0） 、KCl-NaOH（pH=13.0）、甲醇、乙醇、丙酮等体系对反应的影响。结果表明：在碱性介质里，反应体系基本上没有色差，而在中性与酸性介质中出现了比较明显的色差，且在pH为3.6的邻苯二甲酸氢钾-HCl的缓冲溶液中的颜色对比最为明显。 选择pH=3.6的邻苯二甲酸氢钾-HCl作为反应介质

    2.2.2 ?缓冲溶液的用量

    改变邻苯二甲酸氢钾-HCl （pH=3.6）的用量，如图2所示，当邻苯二甲酸氢钾-HCl （pH=3.6）用量在1.0 mL的A值最大且稳定，实验选择邻苯二甲酸氢钾-HCl （pH=3.6）的最佳用量为1.0 mL。

    2.2.3 ?伊红的用量

    改变伊红的用量，如图3所示，当伊红用量在1.5 mL时反应进行完全，吸光度A值达到最大，在增加伊红的用量，吸光度慢慢减小，灵敏度降低，实验选择伊红的最佳用量为1.5 mL。

    2.2.4 ?反应温度

    按照实验方法，分别试验了20， 30，40， 50 ，60℃不同温度对实验测定的影响，结果表明，反应在升到40 ℃时吸光度达最大且稳定，温度大于40 ℃时吸光度逐渐减小，实验选择反应温度为40 ℃。

    2.2.5 ?反应时间

    实验考察了反应时间分别为5、10、15、20、25、30、35 min时对吸光度值的影响，结果显示反应进行15 min 时吸光度值基本稳定， 实验选择加热时间为15 min，迅速冷却15 min后测定。

    2.2.6 ?反应顺序

    按照实验方法，对0.05 mg·10 mL-1盐酸地尔硫卓进行测定，变换添加反应物的顺序，其吸光度测定结果如表1所示。

    2.3 ?工作曲线和检出限

    按照实验方法对盐酸地尔硫卓标准溶液系列进行测定，结果表明：盐酸地尔硫卓的质量浓度在1.5～7.5 mg·L-1范围内与A呈现良好的线性关系，线性回归方程Y=0.488 3X+0.024 5， 相关系数R=0.999 8，表观摩尔吸光系数为4.61×104 L·mol-1·cm-1。按照实验方法测定空白溶液11次，以3倍的标准偏差除以斜率计算方法的检出限为4.6×10-2 mg·L-1

    2.4 ?干扰离子

    按照实验方法对4.5 mg·L-1盐酸地尔硫卓进行测定，在±5%的相对误差范围内，考察了药物赋形剂与常见的离子对该反应的干扰情况。实验表明，1 300倍的蔗糖、130倍的乳糖、110倍的淀粉、、90倍的葡萄糖、900倍的氯化鈉、300倍的K+、220倍的SO4-、20倍的NO3-和均不干扰测定。

    2.5 ?测定盐酸地尔硫卓与伊红的络合比

    采用等摩尔连续变换法和摩尔比法测定盐酸地尔硫卓与伊红生成的电荷转移络合物的组成比为1∶1。

    2.6 ?反应机理的探讨

    盐酸地尔硫卓中的氮原子上有一对孤对电子，可作为 n-电子给予体; 伊红是一平面缺电子体系，可作为电子接受体，盐酸地尔硫卓与伊红反应，可形成1∶1的 n-π电荷转移络合物，根据其络合比推测盐酸地尔硫卓与伊红反应机理如下：

    2.7 ?精密度试验

    按照实验方法测定对4.5 mg·L-1的盐酸地尔硫卓标准溶液进行测定，6次测定结果的相对标准偏差为0.84%，表明方法的精密度较好

    2.8 ?样品分析

    取盐酸地尔硫卓药片（标示量30 mg /片）10片，准确称量后研细混匀，求得每片的平均质量，准确称取相当于半片的质量用水溶解定容到250 mL的容量瓶中，过滤，移取适量的滤液按照实验方法进行测定，平行： 测定6次。测定结果如表2。

    3 ?结 论

    工作建立了荷移光度法测定盐酸地尔硫卓的含量，方法准确、简便、灵敏度较高、选择性和重现性较好、可用于药片中盐酸地尔硫卓含量的测定。

    参考文献

    [1] 高申霞， 吕九如. 流动注射-化学发光法测定盐酸地尔硫卓[J]. 分析试验室， 2007， 26（4）： 21-24.

    [2]唐翎， 张婷， 李新中. 高效液相色谱法测定盐酸地尔硫卓注射液的含量[J]. 中南大学学报（医学版）， 2006， 31（5）： 756-758.

    [3]谈恒山， 杨洁， 肖克岳， 等， 高效液相色谱法测定人体地尔硫卓及其主要代谢产物的药物动力学[J]. 中国医院药学杂志， 1998， 18（1）： 3-5.

    [4]李克， 袁倚盛， 王宏刚， 等， 反相高效液相色谱法测定血浆中地尔硫卓及其药代动力学研究[J]. 药物分析杂志， 1992， 12（1）： 12-14.

    [5]金克宁， 张本全， 饶度宁. 反相高效液相色谱法同时测定人血清中地尔硫卓及卡马西平浓度[J]. 药物分析， 1994， 14（3）： 21.

    [6]李玉赜. 铬天青S荷移分光光度法测定盐酸地尔硫卓含量[J]. 理化检验（化学分册）， 2013， 49（8）： 979-984.